蓝粒小麦花青素生物合成途径中的二氢黄酮醇4-还原酶基因的分子克隆 |
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引用本文: | 杨国华,赵学强,李滨,刘建中,郑琪,童依平,李振声.蓝粒小麦花青素生物合成途径中的二氢黄酮醇4-还原酶基因的分子克隆[J].Journal of Integrative Plant Biology,2003,45(11):1329-1338. |
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作者姓名: | 杨国华 赵学强 李滨 刘建中 郑琪 童依平 李振声 |
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作者单位: | 杨国华(中国科学院遗传与发育生物学研究所植物细胞与染色体工程国家重点实验室,北京,100101;天津师范大学化学与生命科学学院,天津,300074);赵学强,李滨,刘建中,郑琪,李振声(中国科学院遗传与发育生物学研究所植物细胞与染色体工程国家重点实验室,北京,100101);童依平(中国科学院生态环境研究中心,北京,100085) |
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摘 要: | 蓝色色素在蓝粒小麦种子糊粉层中的生物合成途径的分子生物学机制至今仍不清楚.应用RT-PCR和RACE方法从蓝粒小麦正在发育的种子中克隆到一个编码二氢黄酮醇4-还原酶的基因(DFR).推测其为花青素生物合成途径中的一个关键基因,且与蓝粒小麦中蓝色色素形成密切相关;其开放阅读框编码一个包含354个氨基酸残基的多肽,与一些从其他植物中已克隆到的DFR有很高的同源性:大麦(94%)、水稻(83%)、玉米(84%).从长穗偃麦草(2n=70)、蓝粒小麦、浅蓝粒小麦自交产生的白粒后代小麦以及中国春的基因组中分别分离到一个全长DFR序列.经聚类分析表明DFR cDNA核甘酸序列与从中国春基因组中克隆的DFR具有100%的同源性,且与长穗偃麦草、蓝粒小麦、白粒小麦基因组中分离的DFR均有很高的同源性.4个DFR基因组DNA均含有3个内含子,且它们之间的差异主要在内含子区,表明该基因在进化上很保守.经Southern杂交分析,DFR在小麦中至少有3~5个拷贝,不同小麦材料间未见明显差异,但与长穗偃麦草有明显差异,属于一个DFR超基因家族.Northern分析表明该DFR在蓝粒和白粒种子的不同发育时期的表达存在明显差异,都在开花后大约18 d表达最强,在同一时期的蓝白种子中,DFR在蓝粒种子中的表达量高于白粒.DFR转录本在小麦和长穗偃麦草的幼叶中积累多,但在芽鞘中的表达显著低于幼叶中;在小麦的根和长穗偃麦草的发育种子中均未检测到DFR的表达.推测蓝粒小麦中可能存在调控DFR在蓝粒小麦中表达的调控基因,类似于玉米花青素合成途径中的调节基因.
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关 键 词: | 蓝粒小麦 花青素生物合成途径 二氢黄酮醇4-还原酶 长穗偃麦草(2n=70) |
Molecular Cloning and Characterization of a DFR from Developing Seeds of Blue-grained Wheat in Anthocyanin Biosynthetic Pathway |
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Authors: | YANG Guo-Hua ZHAO Xue-Qiang LI Bin LIU Jian-Zhong ZHENG Qi TONG Yi-Ping LI Zhen-Sheng |
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Abstract: | |
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Keywords: | RACE blue-grained wheat anthocyanin biosynthetic pathway dihydroflavonol 4-reductase (DFR) rapid amplification of cDNA ends (RACE) Thinopyrum ponticum (2n=70) |
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