| 骨形成蛋白诱导型真核载体的构建及其表达 |
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| 引用本文： | 朱帮福,卢兹凡,陈苏民,陈南春,纪宗玲,张斌,柴玉波,李毅.骨形成蛋白诱导型真核载体的构建及其表达[J].中国生物化学与分子生物学报,2003,19(1):71-76. |
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| 作者姓名： | 朱帮福 卢兹凡 陈苏民 陈南春 纪宗玲 张斌 柴玉波 李毅 |
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| 作者单位： | 第四军医大学生物化学与分子生物学教研室,西安,710032 |
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| 基金项目： | 全军医药科研基金重点课题 (No 96Z0 45，912 0 0 4)~~ |
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| 摘 要： | 成骨分化相关基因骨钙素 (OC)等的启动子内均含有成骨特异性转录因子Cbfa1特异性作用元件 ,而骨形成蛋白 (bonemorphogeneticprotein ,BMP)的促成骨分化作用正是通过其首先引起Cbfa1的升高 ,而后Cbfa1激活这些基因的表达 ,最终出现成骨分化表型 .为解决BMP没有理想的活性测定方法的问题 ,在RT PCR结果证实BMP 2可促进NIH3T3和C2C12细胞Cbfa1表达后 ,构建了串联6个Cbfa1作用元件的小鼠OC部分启动子 (6OCP)控制萤光素酶 (luciferase)报告基因的真核表达质粒 ,以期来放大BMP诱导报告基因表达的作用效果 .即通过细胞转染、rhBMP 2刺激后检测萤光素酶活性变化 ,从而间接定量测定rhBMP 2的生物学活性 .结果表明 ,pcDNA3 6OCP Luc转染细胞后其报告基因的基础活性较pcDNA3 Luc大为降低 ;而且在一定剂量范围内 ,转染细胞的萤光素酶活性 (荧光值 )随rhBMP 2剂量增加而升高 ,并呈线性正相关 ,为建立BMP活性定量测定的方法打下基础
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| 关 键 词： | 骨形成蛋白 载体构建 基因表达 萤光素酶 |
| 收稿时间： | 2003-02-20 |
| 修稿时间： | 2002年5月28日 |
Construction and Expression of a Eukaryotic Plasmid Induced by Bone Morphogenetic Protein |
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| ZHU Bang fu,LU Zi fan,CHEN Su min ,CHEN Nan chun,JI Zong ling,ZHANG Bin,CHAI Yu bo,LI Yi.Construction and Expression of a Eukaryotic Plasmid Induced by Bone Morphogenetic Protein[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2003,19(1):71-76. |
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| Authors: | ZHU Bang fu LU Zi fan CHEN Su min CHEN Nan chun JI Zong ling ZHANG Bin CHAI Yu bo LI Yi |
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| Institution: | (Department of Biochemistry and Molecular Biology, Fourth Military Medical University, Xi′an 710032,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bone morphogenetic protein construction of vector gene expression luciferase |
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