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血管内皮细胞生长因子启动子突变体萤光素酶报告基因载体的构建
引用本文:张述,刘婕,刘世翠,林娅红,张亚楠,丁丽华,叶棋浓.血管内皮细胞生长因子启动子突变体萤光素酶报告基因载体的构建[J].生物技术通讯,2013(1):37-40.
作者姓名:张述  刘婕  刘世翠  林娅红  张亚楠  丁丽华  叶棋浓
作者单位:1. 厦门长庚医院,福建 厦门 361028
2. 军事医学科学院 生物工程研究所,北京 100850
3. 福建农林大学 生命科学学院,福建 福州 350002
基金项目:国家自然科学基金(31071174)
摘    要:目的:构建含有不同片段血管内皮细胞生长因子(VEGF)基因的启动子的萤光素酶报告基因载体,并定位缺氧诱导因子1a(HIF-1d)结合VEGF启动子的区域。方法:以VEGF全长启动子为模板,PCR扩增VEGF启动子的不同片段,插入萤光素酶报告基因载体pGL4-basic,确定所扩增的DNA序列后,将其与HIF-1a表达载体共转染293T细胞,定位HIF-1a结合VEGF启动子的区域。结果:测序结果表明扩增的不同片段的VEGF启动子序列正确;萤光素酶活性实验表明,-1128~-728bp片段是HIF-1a与VEGF相互作用激活VEGF启动子转录活性的区域。结论:克隆了VEGF启动子5’端缺失突变体报告基因表达载体,为调控VEGF表达的转录因子的筛选及功能研究打下了良好基础。

关 键 词:血管内皮细胞生长因子  启动子  萤光素酶报告基因  转录活性

Construction of a Vector of Luciferase Reporter Gene Directed by VEGF Promoter Mutant
ZHANG Shu,LIU Jie,LIU Shi-Cui,LIN Ya-Hong,ZHANG Ya-Nan,DING Li-Hua,YE Qi-Nong.Construction of a Vector of Luciferase Reporter Gene Directed by VEGF Promoter Mutant[J].Letters in Biotechnology,2013(1):37-40.
Authors:ZHANG Shu  LIU Jie  LIU Shi-Cui  LIN Ya-Hong  ZHANG Ya-Nan  DING Li-Hua  YE Qi-Nong
Institution:1.Xiamen Chang Gung Hospital,Xiamen 361028;2.Beijing Institute of Biotechnology,Beijing 100850;3.College of Life Sciences,Fujian Agriculture and Forestry University,Fuzhou 350002;China
Abstract:
Keywords:
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