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保守GTP酶EF-G在蛋白质合成中的功能研究北大核心CSCD
作者姓名:李志凯  刘光桥  关洪斌  秦燕
作者单位:1.山东大学(威海)海洋学院264209;2.中国科学院生物物理研究所非编码核酸重点实验室100101;
基金项目:"973"计划项目(2012CB911001);国家自然科学基金青年项目(31000596)~~
摘    要:延伸因子G(elongation factor G,EF-G)是一种保守的GTP水解酶,它是蛋白质翻译过程中一个重要的调控因子。同源模拟发现EF-G与核糖体保护蛋白Tet(O)具有相似的空间结构且都包含5个结构域,序列比对发现E.coliEF-G与Campylobacter jejuniTet(O)结构域Ⅳ保守的两个环状区不同。通过分子克隆构建EF-G嵌合体,表达纯化后的蛋白突变体通过核糖体依赖的GTP水解酶(GTPase)活性检测、多聚尿嘧啶(polyU)为mRNA合成苯丙氨酸多肽链、多聚核糖体的解聚检测及相关的体内实验,检测EF-G在肽链合成中的作用,结果发现EF-G嵌合体能够影响肽链生成过程中tRNA-mRNA复合物的移位,但不影响核糖体的再循环过程。

关 键 词:EF—G蛋白  Tet(O)蛋白  基因克隆  蛋白纯化
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