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FMDV vp1基因在烟草中表达及转基因烟草的免疫效果
引用本文:王宝琴,张永光,王小龙,王永录,潘丽,王文秀,董金杰,吕建亮.FMDV vp1基因在烟草中表达及转基因烟草的免疫效果[J].中国病毒学,2005,20(2):140-144.
作者姓名:王宝琴  张永光  王小龙  王永录  潘丽  王文秀  董金杰  吕建亮
作者单位:1. 南京农业大学动物医学院,江苏南京 210095;中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州 730046
2. 中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃兰州 730046
3. 南京农业大学动物医学院,江苏南京 210095
基金项目:863国家高技术研究发展计划生物工程项目(AA213071)
摘    要:通过三亲杂交法,构建克隆有阿克苏(Akesu/58)O型口蹄疫病毒vp1基因的双元表达载体pBin FMDV VP1.采用农杆菌介导法转化NC89烟草叶盘,经卡那霉素筛选,共获得49株抗性植株.对抗性植株总DNA进行目的基因的PCR检测,有40株阳性植株.对阳性植株总RNA进行目的基因的RT-PCR检测,有21株阳性植株.将7株ELISA和Western-blot检测阳性植株叶片提取物分别与弗氏佐剂乳化,在0、15、30和45d腹膜腔接种Balb/C小白鼠,于第4次免疫后第9d进行血清抗体检测;第12d用10 4SM\-\{50\}LD的同源强毒进行攻击;攻毒后24h采血,通过乳鼠病毒血症试验判定攻击Balb/C小白鼠的发病和保护情况.结果表明双元表达载体pBin FMDV VP1构建正确;vp1基因转入NC89烟草并获得表达;7组中有2组Balb/C小白鼠血清抗体呈阳性,攻毒保护率分别为100%和63%.证明2株转基因烟草表达的VP1蛋白具有较好的免疫原性,所免疫的2组Balb/C小白鼠对同源强毒攻击有一定的抵抗能力.

关 键 词:口蹄疫病毒  表达  烟草  免疫  抗体  Balb/C小白鼠
文章编号:1003-5125(2005)02-0140-05
修稿时间:2004年9月16日

Protection of Mice Against Challenge with Foot-and-Mouth Disease Virus by Immunization with vp1 Gene Expressed Transgenic N .Benthamiana
WANG Bao-qin,ZHANG Yong-guang,WANG Xiao-long,WANG Yong-lu,PAN Li,WANG Wen-xiu,DONG Jin-jie,LU Jian-liang.Protection of Mice Against Challenge with Foot-and-Mouth Disease Virus by Immunization with vp1 Gene Expressed Transgenic N .Benthamiana[J].Virologica Sinica,2005,20(2):140-144.
Authors:WANG Bao-qin  ZHANG Yong-guang  WANG Xiao-long  WANG Yong-lu  PAN Li  WANG Wen-xiu  DONG Jin-jie  LU Jian-liang
Abstract:
Keywords:
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