应用寡核苷酸圈套技术研究胰岛素调控人α1(Ⅰ)型胶原基因转录 |
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作者姓名: | 徐振兴 伍严安 陈发林 陈发文 黄毅 马晓宁 |
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作者单位: | 福建省立医院福建医科大学省立临床医学院,福州市350001 |
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摘 要: | 目的 应用寡核苷酸圈套技术研究胰岛素对人COL1A1基因转录的调控.方法 建立稳定转染pCOLH12.5质粒(含CAT基因与人COL1A1基因-2483~+42bp片段)的WI-38细胞株,加入不同剂量胰岛素,测CAT值;分别瞬时转染不同序列ssPT入克隆细胞株中,加入2.5 μmol/ml的胰岛素,测CAT值.结果 2.5 μmol/ml的胰岛素显著增加了COL1A1基因启动子活性;含sp1l位点的ssPT浓度为120 nmol/L时,受胰岛素刺激所增加的CAT值得到显著抑制,不含sp1位点的ssPT无此作用.结论 ssPT能够应用于基因转录调控的研究.胰岛素在人COL1A1基因上的反应元件可能位于启动子-129至-105区域内.
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关 键 词: | 寡核苷酸 胰岛素 基因调控 |
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