| 酿酒酵母超氧物歧化酶(SOD)基因的克隆和表达 |
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| 引用本文： | 张博润,黄英,田宇清谭华荣.酿酒酵母超氧物歧化酶(SOD)基因的克隆和表达[J].生物工程学报,1995,11(1):77-80. |
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| 作者姓名： | 张博润 黄英 田宇清谭华荣 |
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| 作者单位： | 中国科学院微生物研究所北京100080 |
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| 基金项目： | 国际科学基金(IFS) |
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| 摘 要： | 通过PCR扩增技术从酿酒酵母中得到了Cu，zn—SOD的结构基因，此基因被亚克隆到大肠杆菌质粒载体pT7—7．得到重组质粒pT7－7：SOD。利用EcoRI和Pstl酶切pT7-7::SOD质粒．经琼脂糖凝腔电泳，DEAE-滤膜回收Cu。zn—SOD结构基因片段，将其亚克隆到M13中．并转化大肠杆菌，得到了重组质粒M13-::t SOD，酶切和纯化后的SOD基因，定向克隆到酵母质粒载体pHz－8的smal和EcoRI位点上，构建成重组质粒pHZ－8－l。经转化酵母受体菌ZH-l和DP—l后得到了转化子．来自于ZH—l的转化子在非选择性条件下培养40世代后仍有95％以上细胞保留重组质粒。而来自于DP-1的转化子很不稳定。经蛋白提取、聚丙烯酰胺凝胶电泳和酶活性测定结果表明，来自于zH－1转化子中SOD的表达量约为细胞可溶性蛋白的15％．并具有生物活性。
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| 关 键 词： | S0D基因，克隆，表达．酿酒酵母 |
Cloning and Expression of Cu, Zn-SOD of Saccharomyces cerevisiae |
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| Zhang Borun Huang Ying Tian Yuqing Tan Huarong.Cloning and Expression of Cu, Zn-SOD of Saccharomyces cerevisiae[J].Chinese Journal of Biotechnology,1995,11(1):77-80. |
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| Authors: | Zhang Borun Huang Ying Tian Yuqing Tan Huarong |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | SOD gene cloning xpression Saccharomyces cerevisiae |
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