小白链霉菌ε-聚赖氨酸降解酶生理功能分析

目的] 研究小白链霉菌（Streptomyces albulus）中ε-聚赖氨酸降解酶（Pld）的分布特征和生理功能。方法] 利用生物信息学手段对已报道的ε-聚赖氨酸（ε-PL）产生菌的Pld进行挖掘和分析，再通过遗传学方法对小白链霉菌M-Z18基因组中存在的两种pld进行敲除、回补和过表达，最后研究重组菌降解ε-PL能力、最小ε-PL抑制浓度（MIC）及其合成ε-PL情况。结果] PldⅠ和PldⅡ广泛且同时分布于小白链霉菌中，蛋白序列高度保守；PldⅠ、PldⅡ在小白链霉菌M-Z18中均能行使降解ε-PL的功能，但PldⅡ降解活性占主导地位且PldⅠ和PldⅡ对降解ε-PL具有协同作用；pldⅠ、pldⅡ过表达重组菌对ε-PL的MIC值显著提高，其中双过表达pldⅠ和pldⅡ菌株对ε-PL的MIC值是出发菌株的2.19倍。构建的pld重组菌与出发菌株相比，在考察pH值范围内（pH 3.0-5.5）的ε-PL产量未表现出显著差异。结论] 小白链霉菌中广泛分布PldⅠ和PldⅡ且序列高度保守，主要生理功能是保护小白链霉菌在中性环境中免受自身产物ε-PL的抑制。