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黄瓜叶绿素降解关键酶基因CsPAO的克隆与分析
引用本文:程奕秋,刘伟康,陈广玲,孙 锦. 黄瓜叶绿素降解关键酶基因CsPAO的克隆与分析[J]. 西北植物学报, 2021, 41(10): 1635-1642
作者姓名:程奕秋  刘伟康  陈广玲  孙 锦
作者单位:(南京农业大学 园艺学院,南京 210095)
基金项目:国家自然科学基金(31872152);
摘    要:该研究以黄瓜“津春2号”cDNA为模板,采用RT PCR方法克隆得到黄瓜叶绿素降解关键酶(pheophorbide a oxygenase,PAO)基因(CsPAO),对其进行亚细胞定位观察,并采用实时荧光定量PCR技术和生物信息学技术,分析了CsPAO基因的表达模式及其编码蛋白的特性。结果表明:(1)CsPAO编码545个氨基酸,理论等电点为6.09,蛋白相对分子质量为61.02 kD。蛋白预测发现,黄瓜CsPAO属于不稳定蛋白,具有2个蛋白结合位点,且存在跨膜现象。(2)荧光定量PCR结果表明,CsPAO基因表达响应水杨酸(SA)、茉莉酸 (JA)和赤霉素(GA3)的调控,在高温(42 ℃)和低温(4 ℃)处理下CsPAO基因的表达量显著上升并达到最高,但黑暗处理对CsPAO基因表达没有影响;在黄瓜不同组织中花的表达显著高于根、茎、叶、萼、须、果。(3)亚细胞定位结果表明,CsPAO蛋白定位于叶绿体内。(4)系统进化树分析显示,黄瓜CsPAO与葫芦科植物苦瓜、西葫芦、南瓜、笋瓜等亲缘关系较近。本研究结果为进一步揭示黄瓜叶绿素降解的分子机制奠定了基础。

关 键 词:黄瓜;脱镁叶绿酸a加氧酶;生物信息学;表达模式

Cloning and Analysis of Chlorophyll Degradation Key Enzyme Gene (CsPAO) in Cucumis sativus L.
CHENG Yiqiu,LIU Weikang,CHEN Guangling,SUN Jin. Cloning and Analysis of Chlorophyll Degradation Key Enzyme Gene (CsPAO) in Cucumis sativus L.[J]. Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica, 2021, 41(10): 1635-1642
Authors:CHENG Yiqiu  LIU Weikang  CHEN Guangling  SUN Jin
Abstract:
Keywords:cucumber   pheophorbide a oxygenase   bioinformatics   expression patterns
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