| 牛αS1酪蛋白5′调控序列驱动报告基因 LacZ 在奶山羊乳腺上皮细胞中的表达 |
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| 引用本文： | 田雷,李庆章,张莉.牛αS1酪蛋白5′调控序列驱动报告基因 LacZ 在奶山羊乳腺上皮细胞中的表达[J].中国生物化学与分子生物学报,2007,23(9):738-742. |
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| 作者姓名： | 田雷 李庆章 张莉 |
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| 作者单位： | 乳品科学教育部重点实验室,东北农业大学,哈尔滨,150030 |
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| 摘 要： | αS1酪蛋白是牛乳中含量最高的酪蛋白.本研究克隆了牛αS1酪蛋白5′调控序列约1.2 kb的片段，应用基因重组技术将其插入 lacZ 基因上游，构建真核表达载体gαs1p psv.胶原酶消化法对奶山羊乳腺上皮细胞进行了分离培养，并用免疫荧光法鉴定了乳腺上皮细胞. 将重组载体转染奶山羊乳腺上皮细胞，在细胞培养液中，转染后24 h可以检测到 lacZ 基因的表达，之后表达水平有逐渐升高的趋势，72 h开始降低，144 h降到最低；在细胞破碎液中，转染后24 h表达水平最高，之后表达水平有逐渐降低的趋势，144 h降到最低.转染细胞的第1代表达水平最高，随细胞传代表达水平降低，传到第3代时基本检测不到表达产物. 对转染后的细胞进行了β 半乳糖苷酶原位细胞染色. 实验证明,得到的牛αS1酪蛋白5′调控序列能指导外源基因在奶山羊乳腺上皮细胞中表达.
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| 关 键 词： | 山羊乳腺上皮细胞 调控序列 β-半乳糖苷酶 基因表达 |
| 收稿时间： | 2007-4-10 |
| 修稿时间： | 2007年4月10日 |
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