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Lactobacillus diolivorans二醇脱水酶激活因子基因的克隆、测序与功能鉴定
引用本文:孟晓蕾,唐 悦,齐向辉,韦宇拓,黄日波. Lactobacillus diolivorans二醇脱水酶激活因子基因的克隆、测序与功能鉴定[J]. 生物化学与生物物理进展, 2007, 34(1): 87-92
作者姓名:孟晓蕾  唐 悦  齐向辉  韦宇拓  黄日波
作者单位:广西大学广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,南宁 530004;广西大学生命科学与技术学院,南宁 530004;广西大学广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,南宁 530004;广西大学广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,南宁 530004;广西大学生命科学与技术学院,南宁 530004;广西大学广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,南宁 530004;广西大学生命科学与技术学院,南宁 530004;南宁中诺生物工程公司,南宁530003
基金项目:国家“863”高技术研究与发展计划资助项目(2003AA001039).
摘    要:根据二醇脱水酶与甘油脱水酶的激活因子基因序列同源性分析,设计简并引物从L. diolivorans基因组DNA中扩增出了假定的二醇脱水酶激活因子基因 (gldG、gldH) 全序列,补全了GenBank 中该基因序列的未知部分,构建了表达质粒pSE-gldGH,以E. coli BL21为宿主,进行诱导表达. 表达产物的变性与非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明:gldGH表达产生 68 ku、13 ku两个蛋白质,它们经金属螯合亲和层析与凝胶过滤得到共纯化,纯化产物即假定的激活因子为分子质量约325 ku的蛋白质聚合体,由这两个蛋白质以等摩尔量组成,因此假定的激活因子可能为α4β4亚基结构. 以L. diolivorans二醇脱水酶为对象,进行激活实验,结果证实gldGH表达产物具备二醇脱水酶激活因子的功能.

关 键 词:二醇脱水酶,激活因子,功能鉴定,1  3-丙二醇,Lactobacillus diolivorans
收稿时间:2006-06-20
修稿时间:2006-06-20

Cloning, Sequencing and Characterization of Genes Encoding Diol Dehydratase Reactivating Factor of Lactobacillus diolivorans
MENG Xiao-Lei,Tang Yue,QI Xiang-Hui,WEI Yu-Tuo and HUANG Ri-Bo. Cloning, Sequencing and Characterization of Genes Encoding Diol Dehydratase Reactivating Factor of Lactobacillus diolivorans[J]. Progress In Biochemistry and Biophysics, 2007, 34(1): 87-92
Authors:MENG Xiao-Lei  Tang Yue  QI Xiang-Hui  WEI Yu-Tuo  HUANG Ri-Bo
Affiliation:Guangxi Key Laboratory of Subtropical Bioresource Conservation and Utilization, Guangxi University, Nanning 530004, China;College of Life Science and Technology, Guangxi University, Nanning 530004, China;Guangxi Key Laboratory of Subtropical Bioresource Conservation and Utilization, Guangxi University, Nanning 530004, China;Guangxi Key Laboratory of Subtropical Bioresource Conservation and Utilization, Guangxi University, Nanning 530004, China; College of Life Science and Technology, Guangxi University, Nanning 530004, China;Guangxi Key Laboratory of Subtropical Bioresource Conservation and Utilization, Guangxi University, Nanning 530004, China;College of Life Science and Technology, Guangxi University, Nanning 530004, China; Sinozyme Biotech Co. Ltd, Nanning 530003, China
Abstract:
Keywords:diol dehydratase   reactivating factor   characterization   1  3- propanediol   Lactobacillus diolivorans
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