| BALB/c小鼠胚胎干细胞系建立的方法学探讨 |
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| 引用本文： | 孟国良,滕路,薛友纺,尚克刚. BALB/c小鼠胚胎干细胞系建立的方法学探讨[J]. 遗传学报, 2002, 29(7): 581-588 |
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| 作者姓名： | 孟国良 滕路 薛友纺 尚克刚 |
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| 作者单位： | 北京大学生命科学学院,北京,100871 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(批准号:30170456) |
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| 摘 要： | 以小鼠胚胎成纤维细胞（ME）为饲养层，以大鼠心脏细胞条件下培养基（RH－CM）为ES细胞培养基，全面、详尽地对BALB／c小鼠ES细胞的纱和培养方法进行了探讨，成功地建立了一套建立和培养BALB/c小鼠ES细胞系的新方法。这一培养条件不但有效地维持了ES细胞的未分化状态和正常二倍体核型，而且维持了其作为能性胚胎干细胞的一系列特征。实验设计了两种离散方法和两种浓度的消化兴，用来离散增殖的ICM和ICM离散后出现的ES集落。两种离散方法即“一次离散法”，和“多次离散法”，两种浓度的消化液即0．25％。Trypsin－0．04％。EDTA和．005％。Trypsin-0.888％EDTA；同时对ICM离散时机、RH－CM在BALB／c小鼠ES细胞建系和培养中作用进行了探讨。结果表明：在低浓度消化液作用下，采用“多次离散法”离散增殖4天的ICM和ES集落的方法建立BALC／c小鼠的ES细胞系是理想的；从细胞形态、集落形态、增殖生长能力、核型检测、碱性磷酸酶测定以及体内外分化能力表明，所建立的9个BALB/c小鼠ES细胞系符合小鼠胚胎干细胞的一系列特征。
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| 关 键 词： | BALB／c小鼠 胚胎干细胞 大鼠心脏细胞条件培养基 RH－CM 内细胞团 ICM 二倍体核型 |
| 文章编号： | 0379-4172(2002)07-0581-08 |
| 修稿时间： | 2002-01-15 |
Researches on the Methodology of Establishment of BALB/c Murine Embryonic Stem Cell Lines |
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