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| 肺炎支原体重组蛋白抗原的初步鉴定 | |
| 引用本文： | 李保强,赵芝娜,宋焕景,董占双,刘忠顺,王桂珍. 肺炎支原体重组蛋白抗原的初步鉴定[J]. 微生物学杂志, 2005, 25(6): 35-37 |
| 作者姓名： | 李保强 赵芝娜 宋焕景 董占双 刘忠顺 王桂珍 |
| 作者单位： | 1. 解放军202医院,检验科,辽宁,沈阳,110003 2. 沈阳药科大学,微生物与细胞生物学教研室,辽宁,沈阳,110016 3. 中国医科大学基础医学院,病原生物学教研室,辽宁,沈阳,110001 |
| 基金项目： | 辽宁省自然科学基金资助项目(519068)，辽宁省教育厅资助基金项目(2004D226) |
| 摘 要： | 克隆并表达肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)P1黏附蛋白D-2区基因片段,进而对重组蛋白的抗原特异性进行鉴定。应用PCR技术获取目的基因片段,并构建含有目的基因片段的重组质粒,用重组质粒酶切图谱法、PCR扩增及核苷酸测序方法鉴定重组质粒。而后将其转入大肠杆菌BL21菌株,用IPTG诱导目的基因表达,用SDS-PAGE分析重组蛋白的相对分子量,免疫印迹实验鉴定其免疫反应性,并用ELISA实验测定重组蛋白抗原的特异性。结果重组质粒中的p1基因片段经测序后,与GenBank中p1基因核苷酸序列比较,其同源性为99.66%~100%;经SDS-PAGE分析,重组蛋白的相对分子量约为59 ku;免疫印迹实验和ELISA实验证实,Mp免疫血清和Mp感染患者血清都能与重组蛋白发生特异反应。研究中的含P1黏附因子D-2区基因的重组质粒已成功构建,其表达的重组蛋白具有特异的免疫反应性,初步ELISA实验证实,本研究获得的重组蛋白可用于临床标本检测。 |
| 关 键 词： | 肺炎支原体 P1黏附因子 重组蛋白 |
| 文章编号： | 1005-7021(2005)06-0035-03 |
| 修稿时间： | 2005-04-25 |
Initial Identification of Recombinant Protein Antigen of Mycoplasma pneumoniae P1 Adhesion Protein |
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| LI Bao-qiang,ZHAO Zhi-na,SONG Huan-jing,DONG Zhan-shuang,LIU Zhong-shun,WANG Gui-zhen. Initial Identification of Recombinant Protein Antigen of Mycoplasma pneumoniae P1 Adhesion Protein[J]. Journal of Microbiology, 2005, 25(6): 35-37 | |
| Authors: | LI Bao-qiang ZHAO Zhi-na SONG Huan-jing DONG Zhan-shuang LIU Zhong-shun WANG Gui-zhen |
| Affiliation: | LI Bao-qiang~1,ZHAO Zhi-na~2,SONG Huan-jing~3,DONG Zhan-shuang~3,LIU Zhong-shun~3,WANG Gui-zhen~3 |
| Abstract: | |
| Keywords: | Mycoplasma pneumoniae P1 adhesion factor recombinant protein |
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