| 结核分枝杆菌19kD-ESAT6融合蛋白的克隆表达及纯化 |
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| 引用本文： | 拾莉,丁元生,杨华,刘耀婷,刘忠华,胡忠义,黄瑞. 结核分枝杆菌19kD-ESAT6融合蛋白的克隆表达及纯化[J]. 微生物与感染, 2009, 4(1): 26-29 |
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| 作者姓名： | 拾莉 丁元生 杨华 刘耀婷 刘忠华 胡忠义 黄瑞 |
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| 作者单位： | 苏州大学基础医学与生物科学学院,苏州,215123;同济大学附属上海市肺科医院、上海市结核病,肺,重点实验室,上海,200433 |
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| 基金项目： | 国家科技重大专项课题，上海市科学技术委员会专项基金重点项目，上海市研发公共服务平台建设专项课题 |
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| 摘 要： | 运用聚合酶链反应( PCR) 技术从结核分枝杆菌标准株H37Rv 中扩增获得19kD 脂蛋白和esat-6 基因片段, 将目的片段分别克隆到pMD18-T 载体, 再亚克隆目的片段到同一表达载体pET-21a, 构建重组表达载体pET21a-19kD-ESAT6, 转化至大肠埃希菌BL21( DE3) , 表达纯化后用蛋白质印迹法( Western blot) 分析其抗原反应性。结果成功构建了重组质粒pET21a-19kD-ESAT6, 并在大肠埃希菌中获得高效表达。SDS-PAGE 结果显示, 在相对分子质量( Mr) 约29 ×103 处有表达条带。estern blot 结果表明, 重组蛋白19kD-ESAT6 与确诊的结核病患者血清发生特异性免疫反应, 具有特异的抗原性。本研究构建的结核分枝杆菌19kD-ESAT6 融合蛋白为结核病血清学诊断试剂的开发提供了依据。
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| 关 键 词： | 结核分枝杆菌 19kD脂蛋白 早期分泌抗原靶蛋白6 融合蛋白 |
Cloning,expression,and purification of fusion proteins encoded by 19kD-ESAT6 in Mycobacterium tuberculosis |
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| SHI Li,DING Yuan-Sheng,YANG Hua,LIU Yao-Ting,LIU Zhong-Hua,HU Zhong-Yi,HUANG Rui. Cloning,expression,and purification of fusion proteins encoded by 19kD-ESAT6 in Mycobacterium tuberculosis[J]. Journal of Microbes and Infection, 2009, 4(1): 26-29 |
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| Authors: | SHI Li DING Yuan-Sheng YANG Hua LIU Yao-Ting LIU Zhong-Hua HU Zhong-Yi HUANG Rui |
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