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铁皮石斛钙网蛋白基因DoCRT1的分子克隆与表达研究
引用本文:李依民,张 娜,李 欢,黑小斌,高 静,张明英,颜永刚,张 岗.铁皮石斛钙网蛋白基因DoCRT1的分子克隆与表达研究[J].西北植物学报,2017,37(12):2350-2356.
作者姓名:李依民  张 娜  李 欢  黑小斌  高 静  张明英  颜永刚  张 岗
作者单位:(陕西中医药大学 药学院,陕西省中药基础与新药研究重点实验室,西安 712046)
基金项目:国家自然科学基金(31101608);
摘    要:该研究采用RACE克隆铁皮石斛钙网蛋白(calreticulin,CRT)基因DoCRT1,进行生物信息学分析,并借助定量PCR检测基因表达模式,为揭示该基因在铁皮石斛生长发育及逆境生理中的分子作用奠定基础。结果表明:(1)DoCRT1基因(GenBank登录号KT957551)cDNA全长1 672bp,ORF长1 275bp,编码一条由424个氨基酸组成的多肽,分子量49.05kD,等电点4.42,具有CRT蛋白保守的钙网蛋白/钙联接蛋白P结构域(205~320)和类伴刀豆球蛋白凝集素/葡聚糖酶结构域A(20~222)以及多个基序;蛋白N端含有一个信号肽(1~23)和一个跨膜区域(8~24),预测结果显示主要定位于细胞液泡、胞外,与多种植物CRT蛋白一致性很高(80%~87%)。(2)DoCRT1蛋白与OsCRT1/2、ZmCRT1亲缘关系近,聚在CRT进化树的CRT1/2分支。(3)qRT-PCR检测结果显示,DoCRT1基因转录本在石斛根中表达量较高,为叶中的2.23倍,且茎与叶中表达量无显著差异。

关 键 词:铁皮石斛  钙网蛋白  基因克隆  定量PCR

Molecular Cloning and Expression Analysis of a Calreticulin Gene DoCRT1 in Dendrobium officinale
LI Yimin,ZHANG N,LI Huan,HEI Xiaobin,GAO Jing,ZHANG Mingying,YANG Yonggang,ZHANG Gang.Molecular Cloning and Expression Analysis of a Calreticulin Gene DoCRT1 in Dendrobium officinale[J].Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica,2017,37(12):2350-2356.
Authors:LI Yimin  ZHANG N  LI Huan  HEI Xiaobin  GAO Jing  ZHANG Mingying  YANG Yonggang  ZHANG Gang
Abstract:
Keywords:Dendrobium officinale  calreticulin  gene cloning  quantitative PCR
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