| 牛杀菌/通透性增加蛋白对脂多糖介导的炎性细胞因子表达的影响 |
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| 引用本文： | 姚楠,白杰,张雪梅,张宁,吴卫东,李文蓉.牛杀菌/通透性增加蛋白对脂多糖介导的炎性细胞因子表达的影响[J].生物工程学报,2015,31(2):195-205. |
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| 作者姓名： | 姚楠 白杰 张雪梅 张宁 吴卫东 李文蓉 |
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| 作者单位： | 1 农业部草食家畜遗传育种与繁殖重点实验室 新疆维吾尔自治区动物生物技术重点开放实验室 新疆维吾尔自治区畜牧科学院生物技术研究中心，新疆 乌鲁木齐 830000；2 新疆维吾尔自治区人民医院临床医学研究中心，新疆 乌鲁木齐 830000；4 新疆维吾尔自治区克拉玛依市人民医院，新疆 克拉玛依 834000,1 农业部草食家畜遗传育种与繁殖重点实验室 新疆维吾尔自治区动物生物技术重点开放实验室 新疆维吾尔自治区畜牧科学院生物技术研究中心，新疆 乌鲁木齐 830000；3 河南省农业科学院畜牧兽医研究所，河南 郑州 450002,1 农业部草食家畜遗传育种与繁殖重点实验室 新疆维吾尔自治区动物生物技术重点开放实验室 新疆维吾尔自治区畜牧科学院生物技术研究中心，新疆 乌鲁木齐 830000,1 农业部草食家畜遗传育种与繁殖重点实验室 新疆维吾尔自治区动物生物技术重点开放实验室 新疆维吾尔自治区畜牧科学院生物技术研究中心，新疆 乌鲁木齐 830000,2 新疆维吾尔自治区人民医院临床医学研究中心，新疆 乌鲁木齐 830000,1 农业部草食家畜遗传育种与繁殖重点实验室 新疆维吾尔自治区动物生物技术重点开放实验室 新疆维吾尔自治区畜牧科学院生物技术研究中心，新疆 乌鲁木齐 830000 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (No. 30860183) 资助。 |
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| 摘 要： | 杀菌/通透性增加蛋白(Bactericidal/permeability-increasing protein,BPI)能结合并特异地中和来自革兰氏阴性菌外膜的脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)。为了研究牛源BPI蛋白及其N端结构域在LPS介导的免疫应答中的作用,本文将BPI全长1 449 bp编码区序列(BPI)和其N端714 bp的编码区序列(BPI714)分别导入m HEK293细胞,分析了稳定表达的BPI或BPI714对LPS介导的炎性细胞因子表达的影响。首先将构建的p LEX-BPI/p LEX-BPI714载体分别转染m HEK293细胞,获得稳定表达牛源BPI或BPI714的m HEK293细胞;然后用LPS刺激上述细胞,分别收集刺激前、刺激后1 h、3 h、6 h、12 h、24 h、36 h和48 h的细胞,并同时收集未表达BPI或BPI714的m HEK293细胞在各时间点的样品作为对照;采用定量RT-PCR检测上述细胞中炎性细胞因子IL-8、IL-1β、TNF-α、NF-κB-1、NF-κB-2的相对表达水平,比较LPS刺激前后表达BPI/BPI714和对照细胞中上述基因转录水平的变化规律。研究表明,LPS刺激后,对照细胞中IL-8、IL-1β、TNF-α、NF-κB-2表达水平在不同时间点均显著提高(P0.05),并呈现规律性变化;而稳定表达BPI/BPI714的细胞在同样刺激条件下,IL-8、IL-1β、TNF-α、NF-κB-2基因的转录水平均未发生显著变化(P0.05)。根据我们的实验结果,在m HKE293细胞模型中BPI或BPI714均能显著降低LPS介导的炎性细胞因子表达,抑制LPS介导的免疫应答。这不仅为进一步研究BPI抑菌机制和利用其抑菌功能提供了可靠的实验依据,也为分析抗菌蛋白的抗菌效果提供了一种可靠的实验方法。
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| 关 键 词： | 杀菌/通透性增加蛋白 脂多糖 免疫应答 炎性细胞因子 |
| 收稿时间： | 4/4/2014 12:00:00 AM |
Effects on the expression of lipopolysaccharide-induced inflammatory cytokines mediated by bovine bactericidal/ permeability-increasing protein |
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| Nan Yao,Jie Bai,Xuemei Zhang,Ning Zhang,Weidong Wu and Wenrong Li.Effects on the expression of lipopolysaccharide-induced inflammatory cytokines mediated by bovine bactericidal/ permeability-increasing protein[J].Chinese Journal of Biotechnology,2015,31(2):195-205. |
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| Authors: | Nan Yao Jie Bai Xuemei Zhang Ning Zhang Weidong Wu and Wenrong Li |
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| Institution: | Nan Yao;Jie Bai;Xuemei Zhang;Ning Zhang;Weidong Wu;Wenrong Li;Key Laboratory of Genetics, Breeding and Reproduction of Grass Feeding Livestock, Ministry of Agriculture, the Key Laboratory of Animal Biotechnological of Xinjiang, Biotechnological Center, Xinjiang Academy of Animal Science;Clinical Research Center, Xinjiang People’s Hospital;Karamay City People’s Hospital;Institurte of Amimal Science of Henan Academy of Agricultural Sciences; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bactericidal/permeability-increasing protein lipopolysaccharide immune respond inflammatory cytokines |
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