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海马皮质特异性敲除AEG-1基因小鼠的构建及其行为学初步研究*
引用本文:于春洋,张春,郭乐,万盼盼,黄越,王峰,刘昆梅. 海马皮质特异性敲除AEG-1基因小鼠的构建及其行为学初步研究*[J]. 中国生物工程杂志, 1981, 40(11): 10-20. DOI: 10.13523/j.cb.2008128
作者姓名:于春洋  张春  郭乐  万盼盼  黄越  王峰  刘昆梅
作者单位:1 宁夏医科大学宁夏颅脑疾病重点实验室 银川 7500042 宁夏回族自治区医学科学研究所 银川 7500043 宁夏医科大学宁夏临床医学院 银川 7500044 宁夏医科大学药学院 银川 7500045 宁夏医科大学总医院神经外科 银川 750004
基金项目:* 国家自然科学基金(31660267);宁夏自然科学基金(2018AAC02018);宁夏青年科技人才托举工程(TJGC2018033)
摘    要:星形胶质细胞上调基因-1(astrocyte upregulating gene-1,AEG-1)是HIV伴随老年痴呆患者脑组织中发现的星形胶质细胞上调基因之一,近年来研究表明其调控多种中枢神经系统疾病,但其在学习认知上的研究尚未见报道。海马和皮质在学习认知中起重要作用,利用CRISPR/Cas9技术结合Cre/loxp系统构建海马皮质特异性AEG-1敲除小鼠,在此模型鼠的基础上对AEG-1和学习认知的相关性进行初步研究。首先构建插入loxp位点的flox纯合型AEG-1fl/fl小鼠,与海马、新皮层特异性表达Cre+/+重组酶的工具鼠进行繁育,利用PCR技术筛选出子代基因型为AEG-1fl/fl Cre+的海马皮质特异性AEG-1敲除小鼠;然后利用Western blot技术和免疫荧光技术检测AEG-1基因在小鼠海马皮质中的敲除效率;最后应用新物体识别箱和三腔社会互动箱并结合SMART 3.0分析系统,对海马皮质特异性AEG-1敲除小鼠的学习记忆和社会交互行为学进行初步评价。结果显示:成功获得子代基因型为AEG-1fl/fl Cre+的基因敲除小鼠;AEG-1条件性敲除小鼠海马和皮质中AEG-1蛋白质表达水平较对照组显著降低;新物体识别结果表明AEG-1条件性敲除小鼠的区分系数明显低于对照组,表明AEG-1条件性敲除小鼠的学习记忆能力较弱,但是三腔交互结果表明AEG-1条件性敲除小鼠在社会交互上与对照组相比无明显差异。以上结果为AEG-1在学习认知方面的进一步研究奠定了基础。

关 键 词:AEG-1  Cre/loxp系统  条件性敲除  学习认知  
收稿时间:2020-08-20

Construction of Hippocampal Cortical Specific Knockout AEG-1 Gene Mice and Preliminary Study on Its Behavior
YU Chun-yang,ZHANG Chun,GUO Le,WAN Pan-pan,HUANG Yue,WANG Feng,LIU Kun-mei. Construction of Hippocampal Cortical Specific Knockout AEG-1 Gene Mice and Preliminary Study on Its Behavior[J]. China Biotechnology, 1981, 40(11): 10-20. DOI: 10.13523/j.cb.2008128
Authors:YU Chun-yang  ZHANG Chun  GUO Le  WAN Pan-pan  HUANG Yue  WANG Feng  LIU Kun-mei
Abstract:
Keywords:AEG-1  Cre/loxp system  Conditional knockout  Learning and cognition  
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