| 大肠杆菌O157:H7中编码vt2基因的噬菌体的分离与鉴定 |
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| 引用本文： | 张慧英,孙建和,严亚贤.大肠杆菌O157:H7中编码vt2基因的噬菌体的分离与鉴定[J].中国病毒学,2005,20(6):668-672. |
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| 作者姓名： | 张慧英 孙建和 严亚贤 |
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| 作者单位： | 上海交通大学农业与生物学院,上海,201101 |
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| 基金项目： | 上海市农委重点攻关项目(沪农科攻字(2004)第11-4号);上海市教委曙光计划项目(B2002186) |
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| 摘 要： | 根据GenBank中VT1、VT2毒素的基因序列设计合成2对引物,以大肠杆菌O157H7菌株DNA为模板,扩增vt1、vt2.诱导只扩增出vt2的菌株释放噬菌体,利用多种指示菌经双层琼脂平板法来分离纯化VT2噬菌体,观察噬菌斑的特征,提纯病毒粒子进行电镜观察,并对噬菌体中vt2基因检测、克隆和序列分析.结果显示VT2噬菌体感染MC1061在双层琼脂平板上形成的噬菌斑小而混浊,多呈磨玻璃样;而首次感染大肠杆菌CC118(λpir),此后用MC1061分离的噬菌体,再以MC1061为指示菌,在双层琼脂平板上形成小而清晰透明的噬菌斑.电镜下噬菌体头部呈六边形外廓,尾部细长无尾鞘结构.以噬菌体DNA为模板进行PCR扩增,检测到vt2特异性DNA带,克隆的vt2基因序列与GenBank中编码VT2毒素的核苷酸序列(X07865,NC_002655,BA000007,AF291819)的同源性分别达到99%,确定编码VT2毒素的基因位于噬菌体上,并获得VT2噬菌体()HY.
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| 关 键 词： | 大肠杆菌O157H7 VT2噬菌体 形态特征 vt2基因 序列分析 |
| 文章编号： | 1003-5125(2005)06-0668-05 |
| 修稿时间： | 2005年5月23日 |
Isolation and Identification of Bacteriophage Verotoxin 2 Gene from E. coli O157:H7 |
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| ZHANG Hui-ying,SUN Jian-he,YAN Ya-xian.Isolation and Identification of Bacteriophage Verotoxin 2 Gene from E. coli O157:H7[J].Virologica Sinica,2005,20(6):668-672. |
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| Authors: | ZHANG Hui-ying SUN Jian-he YAN Ya-xian |
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