| 定点突变提高里氏木霉木聚糖酶 (XYN II) 的稳定性 |
| |
| 引用本文： | 韩承业,余世袁,欧阳嘉,李鑫,周娟,许艳.定点突变提高里氏木霉木聚糖酶 (XYN II) 的稳定性[J].生物工程学报,2010,26(5):623-629. |
| |
| 作者姓名： | 韩承业 余世袁 欧阳嘉 李鑫 周娟 许艳 |
| |
| 作者单位： | 南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室,南京,210037 |
| |
| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划 (863计划) (Nos. 2007AA02Z213, 2006AA020204)，国家重点基础研究发展计划 (973计划) (No. 2007CB707800) 资助。 |
| |
| 摘 要： | 通过定点突变的方法，在来源于里氏木霉Trichderma reesei的木聚糖酶XYN II的N-末端两个β折叠片层间添加二硫键，以提高木聚糖酶的稳定性。原酶XYN-OU和突变酶XYN-HA12 (T2C、T28C和S156F) 分别在毕赤酵母中分泌表达，突变酶与原酶纯化后进行酶学性质比较。结果表明：突变酶最适反应温度由50℃提高到60℃；在70℃的半衰期由1 min提高到14 min；最适反应pH为5.0，与原酶保持一致，但是在50℃、30 min条件下的pH稳定范围由4.0~9.0扩展到3.0~10.0。对木聚糖酶分子改良的结果反映出在β片层间添加二硫键可以有效改善酶在较高温度下三维结构的刚性，提高热稳定性。
|
| 关 键 词： | 定点突变，木聚糖酶，热稳定性，里氏木霉 |
| 收稿时间： | 2009/11/25 0:00:00 |
Enhancing stability of Trichoderma reesei xylanase (XYN II) by site-directed mutagenesis |
| |
| Chengye Han,Shiyuan Yu,Jia Ouyang,Xin Li,Juan Zhou and Yan Xu.Enhancing stability of Trichoderma reesei xylanase (XYN II) by site-directed mutagenesis[J].Chinese Journal of Biotechnology,2010,26(5):623-629. |
| |
| Authors: | Chengye Han Shiyuan Yu Jia Ouyang Xin Li Juan Zhou and Yan Xu |
| |
| Institution: | Key Laboratory of Forest Genetics & Biotechnology, Ministry of Education, Nanjing Forestry University, Nanjing 210037, China;Key Laboratory of Forest Genetics & Biotechnology, Ministry of Education, Nanjing Forestry University, Nanjing 210037, China;Key Laboratory of Forest Genetics & Biotechnology, Ministry of Education, Nanjing Forestry University, Nanjing 210037, China;Key Laboratory of Forest Genetics & Biotechnology, Ministry of Education, Nanjing Forestry University, Nanjing 210037, China;Key Laboratory of Forest Genetics & Biotechnology, Ministry of Education, Nanjing Forestry University, Nanjing 210037, China;Key Laboratory of Forest Genetics & Biotechnology, Ministry of Education, Nanjing Forestry University, Nanjing 210037, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | site directed mutagenesis xylanase thermostability Trichoderma reesei |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《生物工程学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《生物工程学报》下载免费的PDF全文 |
|
