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| 花鳗鲡脑cDNA文库的构建及GnRh日基因克隆与表达分析 | |
| 引用本文： | 黄海,张勇,刘晓春,尹绍武,杨丽萍,朱培,齐兴柱,林浩然.花鳗鲡脑cDNA文库的构建及GnRh日基因克隆与表达分析[J].水生生物学报,2009,33(2). |
| 作者姓名： | 黄海 张勇 刘晓春 尹绍武 杨丽萍 朱培 齐兴柱 林浩然 |
| 作者单位： | 1. 中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室,中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种,繁育重点实验室,广州,510275;海南大学海洋学院热带生物资源教育部重点实验室,海口,570228 2. 中山大学有害生物控制与资源利用国家重点实验室,中山大学水生经济动物研究所暨广东省水生经济动物良种,繁育重点实验室,广州,510275 3. 海南大学海洋学院热带生物资源教育部重点实验室,海口,570228 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金面上项目，国家科技支撵计划重点项目，广东省科技兴海(渔)项目，海南大学科研项目，海南省教育厅高等学校科学研究项目 |
| 摘 要： | 以花鳗鲡脑组织为材料,提取总RNA,应用CloneminerTM文库构建试剂盒构建cDNA文库.经检测,文库的滴度为4.3×106 cfu/mL,总容量为5.16×107cfu/mL,阳性克隆率为99.6%,插入片段0.43-3.2kb之间,平均插入片段大小为1532bp.以文库为模板,克隆获得花鳗鲡两种类型的促性腺激素释放激素(mGnRH和cGnRH-Ⅱ)cDNA序列.序列分析表明,花鳗鲡mGnRH cDNA开放阅读框(ORF)包含276个碱基,编码91个氨基酸,其中包括22个氨基酸的蛋白质前体信号肽(1-22位氨基酸)、mGnRH十肽(23-32位氨基酸)、一个三肽裂解位点(33-35位氨基酸)和56个氨基酸的GnRH相关肽(36-91位氨基酸);花鳗鲡cGnRH-Ⅱ cDNA开放阅读框包含264个碱基,编码87个氨基酸,其中包括24个氨基酸的蛋白质前体信号肽(1-24位氨基酸)、cGnRH-Ⅱ十肽(25-34位氨基酸)、一个三肽裂解位点(34-36位氨基酸)和50个氨基酸的GnRH相关肽(37-87位氨基酸).序列同源性分析表明,花鳗鲡mGnRH、cGnRH-Ⅱ cDNA与日本鳗鲡之间的相似性率高达98%;与鲑形目、鲈形目、鲽形目鱼类的相似率为73%-78%;而与鲤形目鱼类的相似性相对较低(63%-67%).采用RT-PCR方法分析了两种GnRH基因在花鳗鲡雌雄个体中的表达,结果表明两基因在雌雄个体的组织表达模式无明显差异;但mGnRH基因在雌雄个体内表达部位多于cGnRH-Ⅱ的. |
| 关 键 词： | 花鳗鲡 cDNA文库 促性腺激素释放激素 克隆 基因表达 |
CONSTRUCTION OF BRAIN CDNA LIBRARIES AND MOLECULAR CLONING AND EXPRESSION ANALYSIS OF GNRH GENE IN MARBLED EEL (ANGUILLA MARMORATA) |
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| HUANG Hai,ZHANG Yong,LIU Xiao-Chun,YIN Shao-Wu,YANG Li-Ping,ZHU Pei,QI Xing-Zhu,LIN Hao-Ran.CONSTRUCTION OF BRAIN CDNA LIBRARIES AND MOLECULAR CLONING AND EXPRESSION ANALYSIS OF GNRH GENE IN MARBLED EEL (ANGUILLA MARMORATA)[J].Acta Hydrobiologica Sinica,2009,33(2). | |
| Authors: | HUANG Hai ZHANG Yong LIU Xiao-Chun YIN Shao-Wu YANG Li-Ping ZHU Pei QI Xing-Zhu LIN Hao-Ran |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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