青稞NBS LRR类基因HvtRGA的克隆与条纹病胁迫表达分析

为探索青稞(Hordeum vulgare L. var. nudum)NBS LRR类基因在青稞抗条纹病中的分子作用机制，该研究以抗条纹病青稞品种‘昆仑14号’和感病品种‘Z1141’为材料，从叶片中克隆了HvtRGA 基因。HvtRGA基因长3 544 bp，包含一个3 306 bp开放阅读框，编码1 101个氨基酸。序列测序后比对发现，‘昆仑14号’与‘Z1141’的碱基序列相似性为99.89%，‘Z1141’的碱基在1196和1945位置处由G替换成A，但氨基酸序列相似性为100%。蛋白质序列分析表明，HvtRGA为亲水性的不稳定酸性蛋白，具有NB ARC保守结构域和5个LRR结构域，属于 NBS LRR 家族。HvtRGA蛋白与大麦的rgaS 9217、rgaS 226编码的NBS LRR氨基酸序列相似性分别为96.55%和88.72%。进化树分析表明，青稞与小麦族的大麦、硬粒小麦和二穗短柄草NBS LRR聚为一个分支，且与大麦 rgaS 9217编码的蛋白亲缘关系最近，其次是大麦rgaS 226编码的蛋白，而与狗尾草和栗的亲缘关系最远。qRT PCR结果表明，条纹病胁迫下，抗病品种和感病品种的HvtRGA基因的表达量极显著升高，且抗病品种‘昆仑14号’感病后基因表达量显著高于感病品种‘Z1141’。研究推测，HvtRGA 基因在青稞抗条纹病的调控过程中可能发挥着重要作用。

Isolation and Expression Analysis of NBS LRR HvtRGA Gene in Hulless Barley under Stripe Disease Stress