| 中华蜜蜂气味受体基因AcerOr1 RNA最佳干扰片段的筛选 |
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| 引用本文： | 郭丽娜,赵慧婷,任有蛇,徐兵,姜玉锁.中华蜜蜂气味受体基因AcerOr1 RNA最佳干扰片段的筛选[J].环境昆虫学报,2020,42(5):1068-1075. |
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| 作者姓名： | 郭丽娜 赵慧婷 任有蛇 徐兵 姜玉锁 |
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| 作者单位： | 山西农业大学动物科技学院, 山西太谷030801;山西农业大学生命科学院, 山西太谷030801;山西农业大学工学院, 山西太谷030801 |
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| 基金项目： | 山西农业大学校青年科技创新（J141902180）；山西省“省1331”高校科技创新（J241942004）；优秀博士来晋奖励（K271899063） |
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| 摘 要： | 为了更好地筛选出中华蜜蜂气味受体基因AcerOr1有效干扰序列，本研究以中华蜜蜂气味受体基因AcerOr1为靶标，分别选取3个片段AcerOr1-1（429 bp）、AcerOr1-2（218 bp）和AcerOr1-3（543 bp），并构建相应的dsRNA表达载体，获取dsRNA后通过单只饲喂进行体内RNAi实验，运用qPCR和Western从mRNA水平和蛋白水平检测干扰效率。实验结果显示：片段大小429 bp组dsAcerOr1-1和对照组mRNA表达量之间不具有显著的统计学差异（P＞0.05），片段大小为218 bp的dsAcerOr1-2组和片段大小为543 bp的dsAcerOr1-3组对AcerOr1表达量都有显著的抑制（P＜0.05），抑制率分别为88.85%±0.12%和69.16%±1.06%，以片段大小为218 bp的dsAcerOr1-2干扰效果最佳。Western blot结果显示：与mRNA表达水平检测结果一致，饲喂dsAcerOr1-1 AcerOr1蛋白的表达量与对照组差异不显著（P＞0.05），而饲喂dsAcerOr1-2和dsAcerOr1-3后AcerOr1蛋白的表达量均受到显著抑制（P＜0.05）。本试验成功构建AcerOr1基因干扰载体，最终确定218 bp的dsAcerOr1-2为最佳干扰片段，证实其能有效抑制目的基因mRNA和蛋白的表达，为进一步研究该基因的体内外功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 中华蜜蜂 AcerOr1基因 RNA干扰 |
Construction of RNA interference plasmid targeting of AcerOr1 and optimal interference efficiency determination |
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| GUO Li-N,ZHAO Hui-Ting,REN You-She,XU Bing,JIANG Yu-Suo.Construction of RNA interference plasmid targeting of AcerOr1 and optimal interference efficiency determination[J].Journal of Environmental Entomology,2020,42(5):1068-1075. |
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| Authors: | GUO Li-N ZHAO Hui-Ting REN You-She XU Bing JIANG Yu-Suo |
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