| 猪瘟病毒E2蛋白A/D抗原区基因在酵母中的分泌表达与鉴定 |
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| 引用本文： | 徐学清,张素芳,郑其升,苏小运,任雪枫,陈溥言. 猪瘟病毒E2蛋白A/D抗原区基因在酵母中的分泌表达与鉴定[J]. 中国病毒学, 2004, 19(6): 598-601 |
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| 作者姓名： | 徐学清 张素芳 郑其升 苏小运 任雪枫 陈溥言 |
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| 作者单位： | 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏,南京,210095 |
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| 基金项目： | 国家863高技术发展计划资助项目(2001AA249012). |
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| 摘 要： | 基于猪瘟病毒主要保护性抗原E2囊膜糖蛋白有两个相对独立的抗原结构单位-B/C抗原区和A/D抗原区,设计一对特异性的引物扩增猪瘟病毒E2蛋白的A/D抗原区基因,并将PCR产物克隆入含有强启动子PAox1和α-MF信号肽序列的巴斯德毕赤酵母表达载体pPICZαC中,构建成重组质粒pPICZα-AD,酶切线性化后电穿孔导入巴斯德毕赤酵母X33菌中,经ZeocinTM筛选得到5株高拷贝转化子,甲醇诱导表达.SDS-PAGE和Westernblot试验表明酵母培养上清液中含有具有良好反应原性的E2蛋白,蛋白表达量达175.8μg/mL.N-糖基化分析显示该表达蛋白在分泌过程中发生糖基化.该研究为研制防治猪瘟的亚单位疫苗与诊断试剂盒奠定基础.
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| 关 键 词： | 猪瘟病毒 A/D抗原区 毕赤酵母 表达 |
| 文章编号： | 1003-5125(2004)06-0598-04 |
| 修稿时间： | 2004-05-21 |
Secretion Expression of the Gene Encoding Classical Swine Fever Virus E2 A/D Antigenic Domain in Pichia pastoris and Identification of the Protein |
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| XU Xue-qing,ZHANG Su-fang,ZHENG Qi-sheng,SU Xiao-yun,REN Xue-feng,CHEN Pu-yan. Secretion Expression of the Gene Encoding Classical Swine Fever Virus E2 A/D Antigenic Domain in Pichia pastoris and Identification of the Protein[J]. Virologica Sinica, 2004, 19(6): 598-601 |
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| Authors: | XU Xue-qing ZHANG Su-fang ZHENG Qi-sheng SU Xiao-yun REN Xue-feng CHEN Pu-yan |
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| Affiliation: | 1.Key lab of Animal Diagnostic and Immunology, Ministry of Agriculture, Nanjing Agricultural University, Nanjing , 210095 , China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CSFV A/D antigenic domain Pichia pastoris Expression |
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