欧前胡素调节Gas6/Axl轴对膀胱癌荷瘤小鼠免疫功能的影响

摘要 目的：探讨欧前胡素（IMP）调节生长停滞特异蛋白6（Gas6）/Axl轴对膀胱癌荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法：从60只SPF级雄性C57BL/6小鼠中随机选取12只小鼠作为对照组（CON组），其余小鼠平均分为Model组、IMP组、Gas6组、IMP+Gas6组，每组12只，往其左侧前肢皮下注射0.2 mL浓度为1×10⁷个/mL的鼠源性膀胱癌肿瘤细胞系T739细胞溶液（Model组和IMP组注射对照载体的T739稳转株细胞，Gas6组和IMP+Gas6组注射过表达Gas6的T739稳转细胞株）造模。造模成功后，IMP组及IMP+Gas6组通过腹腔注射5 mg/kg的IMP；CON组、Model组及Gas6组通过腹腔注射等量的生理盐水，2天1次，持续5次。测量小鼠肿瘤体积和重量；测定胸腺指数和脾脏指数；酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清白介素2（IL-2）、γ干扰素（IFN-γ）、血管内皮生长因子（VEGF）水平；苏木精-伊红（HE）染色检查肿瘤组织病理变化；流式细胞术检测T细胞亚群；TUNEL染色检测细胞凋亡；蛋白质印迹法（Western blot）检测Gas6/Axl通路相关蛋白表达。结果：Model组肿瘤细胞整体上排列松散，出现不同程度的核固缩、核碎裂现象；IMP则可以逆转该现象，使肿瘤细胞排列重新变得紧密，细胞核固缩程度提升，核碎裂现象降低；Model组较CON组肿瘤体积、肿瘤质量、CD8⁺细胞百分比、Gas6、Axl蛋白水平、VEGF水平显著增加（P<0.05），胸腺指数和脾脏指数、IL-2、IFN-γ、CD4⁺细胞百分比、CD4⁺/CD8⁺、肿瘤细胞凋亡率显著下降（P<0.05）；与Model组相比，IMP组胸腺指数和脾脏指数、IL-2、IFN-γ、CD4⁺细胞百分比、CD4⁺/CD8⁺、肿瘤细胞凋亡率显著升高（P<0.05），肿瘤体积、肿瘤质量、CD8⁺细胞百分比、Gas6、Axl蛋白水平、VEGF水平显著下降（P<0.05）；而Gas6组结果与IMP组趋势相反；而IMP+Gas6组的结果显示：IMP能逆转Gas6过表达后对膀胱癌荷瘤小鼠的促瘤作用。结论：IMP可能通过下调Gas6/Axl信号通路改善膀胱癌荷瘤小鼠免疫功能，从而产生抑瘤效果。

Effect of Imperatorin Regulating Gas6/Axl Axis on Immune Function of Bladder Cancer Bearing Mice