| 汉滩病毒84FLi株L片段全长cDNA克隆的构建及鉴定 |
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| 引用本文： | 张野,李新红,黄长形,王平忠,姜泓,白雪帆.汉滩病毒84FLi株L片段全长cDNA克隆的构建及鉴定[J].生物技术通讯,2007,18(6):905-908. |
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| 作者姓名： | 张野 李新红 黄长形 王平忠 姜泓 白雪帆 |
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| 作者单位： | 第四军医大学,唐都医院全军感染病诊疗中心,陕西,西安,710038 |
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| 摘 要： | 目的：克隆汉滩病毒84FLi株L片段的cDNA。方法：提取病毒总RNA，反转录为cDNA模板，用高保真的Toq酶扩增出含有L片段部分克隆的片段84L1（1-1875）、84L2（1725—3352）、84L3（2921-4961）和84L4（4727—6533），将这4个片段分别与T载体pGEM-T-Easy连接，转化感受态大肠杆菌后获得4个克隆pGEM—L1、pGEM—L2、pGEM—L3和pGEM—L4。利用酶切连接方法获得pGEM—L12和pGEM-L34，2段产物覆盖全长的L片段，并且于2921—3352nt区域内相互重叠；再利用酶切连接的方法获得了含有L片段全序列的cDNA克隆。结果：获得6个含有L片段部分片段的克隆，进而酶切组装为含有L片段全序列的cDNA克隆。结论：应用分段克隆和逐次拼接法成功构建了84FLi株L片段全序列的cDNA克隆。
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| 关 键 词： | 汉坦病毒 依赖RNA的RNA聚合酶 基因克隆 |
| 文章编号： | 1009-0002（2007）06-0905-04 |
| 修稿时间： | 2007-03-21 |
Cloning of the Full-length Complementary DNA of L Gene of Hantaan Virus 84FLi Strain |
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| ZHANG Ye,LI Xin-hong,HUANG Chang-xing,WANG Ping-zhong,JIANG Hong,BAI Xue-fan.Cloning of the Full-length Complementary DNA of L Gene of Hantaan Virus 84FLi Strain[J].Letters in Biotechnology,2007,18(6):905-908. |
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| Authors: | ZHANG Ye LI Xin-hong HUANG Chang-xing WANG Ping-zhong JIANG Hong BAI Xue-fan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hantavirus RNA-dependent RNA polymerase gene cloning |
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