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结核分枝杆菌Rvl009结构域基因的克隆、表达及亲和层析纯化
引用本文:樊爱琳 苏明权 师长宏 徐志凯 柏银兰 马静 刘家云 张建芳 程晓东 郝晓柯. 结核分枝杆菌Rvl009结构域基因的克隆、表达及亲和层析纯化[J]. 生物技术通讯, 2007, 18(4): 557-560
作者姓名:樊爱琳 苏明权 师长宏 徐志凯 柏银兰 马静 刘家云 张建芳 程晓东 郝晓柯
作者单位:[1]第四军医大学,西京医院检验科,西安710032 [2]第四军医大学,实验动物中心,西安710032 [3]第四军医大学,基础部微生物教研室,西安710032 [4]第四军医大学,西京医院中医科,西安710032
基金项目:国家自然科学基金(30670116,30500432)
摘    要:目的:克隆结核分枝杆菌Rvl009结构域基因,经序列测定正确后进行融合表达和纯化。方法:采用PCR从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增出Rvl009结构域基因,用限制性内切酶消化后插入pUC-19克隆载体中,经测序正确后亚克隆到融合表达载体pPro-EXHT中,转化大肠杆菌DH5α,目的基因经IPTG诱导,由T7启动子调控表达了N端带6个连续组氨酸残基的Rvl009结构域多肽,在变性条件下对目的蛋白进行纯化。结果:获得了结核分枝杆菌Rvl009结构域基因,得到融合6个组氨酸残基的Rvl009结构域多肽,纯化获得的蛋白纯度大于87%。结论:构建了结核分枝杆菌Rvl009结构域基因的重组表达载体,并获得了高纯度的融合表达蛋白,为后续深入研究奠定了基础。

关 键 词:结核分枝杆菌 克隆 表达 纯化 西安710032
文章编号:1009-0002(2007)04-0557-04
修稿时间:2006-10-30

Cloning and Fusion Expression of Mycobacterium tuberculosis Rvl009 Domain Gene and its Purification Using Affinity Chromatography
Abstract:
Keywords:Mycobacterium tuberculosis   clone   expression   purified
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