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毕赤酵母高密度发酵产Ⅲ型类人胶原蛋白及其胃粘膜修复功能
引用本文:李伟娜,尚子方,段志广,李林波,贺婧,范代娣.毕赤酵母高密度发酵产Ⅲ型类人胶原蛋白及其胃粘膜修复功能[J].生物工程学报,2017,33(4):672-682.
作者姓名:李伟娜  尚子方  段志广  李林波  贺婧  范代娣
作者单位:1 西北大学 化工学院 陕西省可降解生物医用材料重点实验室,陕西 西安 710069; 2 西北大学 化工学院 陕西省生物材料与发酵工程技术研究中心,陕西 西安 710069,1 西北大学 化工学院 陕西省可降解生物医用材料重点实验室,陕西 西安 710069; 2 西北大学 化工学院 陕西省生物材料与发酵工程技术研究中心,陕西 西安 710069,1 西北大学 化工学院 陕西省可降解生物医用材料重点实验室,陕西 西安 710069; 2 西北大学 化工学院 陕西省生物材料与发酵工程技术研究中心,陕西 西安 710069,1 西北大学 化工学院 陕西省可降解生物医用材料重点实验室,陕西 西安 710069; 2 西北大学 化工学院 陕西省生物材料与发酵工程技术研究中心,陕西 西安 710069,1 西北大学 化工学院 陕西省可降解生物医用材料重点实验室,陕西 西安 710069; 2 西北大学 化工学院 陕西省生物材料与发酵工程技术研究中心,陕西 西安 710069,1 西北大学 化工学院 陕西省可降解生物医用材料重点实验室,陕西 西安 710069; 2 西北大学 化工学院 陕西省生物材料与发酵工程技术研究中心,陕西 西安 710069
基金项目:陕西省教育厅重点实验室科研计划项目 (No. 16JS104),博士后科学基金面上项目 (No. 2015M582698),西北大学科研启动金 (No. 338050025) 资助。
摘    要:为提高重组毕赤酵母Pichia pastoris发酵重组人Ⅲ型胶原蛋白产量,采用响应面对其生长阶段的BMGY培养基(Buffered minimal glycerol-complex medium)组成进行优化。通过Placket-Burman试验,得出酵母提取物、蛋白胨、甘油对胶原蛋白产量有显著影响,通过Box-Behnken中心组合实验以及Design-Expert分析软件建立了以胶原蛋白产量为响应值的响应方程,得到最适浓度分别为酵母提取物1.13%,蛋白胨1.61%,甘油0.86%。经实验验证,在最优BMGY培养基条件下培养12 h后,所得到毕赤酵母干重为4.41 g/L,生长阶段的菌重量增加了26%。在22 L发酵罐中通过高密度发酵,产量达到4.71 g/L。该重组胶原蛋白对大鼠乙酸灼伤胃粘膜有明显修复作用,为生物医用材料的应用制备奠定了基础。

关 键 词:毕赤酵母,重组人Ⅲ型胶原蛋,响应面优化法,胃粘膜
收稿时间:2016/10/14 0:00:00
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