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| CMV甜瓜分离物外壳蛋白基因的克隆及植物表达载体的构建 | |
| 引用本文： | 马新艳,古勤生,刘丽锋,李宁,杨民和,彭斌,李莉. CMV甜瓜分离物外壳蛋白基因的克隆及植物表达载体的构建[J]. 中国病毒学, 2005, 20(3): 307-310 |
| 作者姓名： | 马新艳 古勤生 刘丽锋 李宁 杨民和 彭斌 李莉 |
| 作者单位： | 1. 中国农业科学院郑州果树研究所生物技术中心,河南郑州,450009;江西农业大学农学院,江西南昌,330045 2. 中国农业科学院郑州果树研究所生物技术中心,河南郑州,450009 3. 福建师范大学生物工程学院,福建福州,350007 |
| 基金项目： | 国家"863"资助(2004AA241171);河南省科技攻关项目(0324050015) |
| 摘 要： | 从河南省临颖县采集的病毒感染的甜瓜样本经ELISA检测和接种分离获得黄瓜花叶病毒(Cucunber mosaic virus ,CMV) 分离物.把该分离物接种西葫芦, 从发病的叶片中提取总RNA,并以此为模板经RT-PCR扩增获得CMV的外壳蛋白(cp)基因,将其克隆到pUCm-T质粒上.经序列测定和分析,结果表明该cp基因由657个核苷酸组成,编码218个氨基酸.其核苷酸序列与黄瓜花叶病毒亚组I的分离物有较高的同源性,达92.2%～93.9%,与亚组II的同源性仅为76.8%～77.8%,与我国报道的CMV分离物的cp基因序列比较,除香蕉株系XB外核苷酸序列的同源性达91.8%～93.4%.根据这些分析,该CMV分离物属于亚组I.将cp基因通过中间载体pJIT163定向克隆到植物表达载体pBINPLUS中(重组双元载体质粒命名为pBCP),并经冻融法导入农杆菌中,经PCR及酶切鉴定,证实质粒已被导入.利用该植物表达载体对西瓜的遗传转化工作目前正在进行中. |
| 关 键 词： | CMV 中国分离物 外壳蛋白基因 序列分析 植物表达载体 |
| 文章编号： | 1003-5125(2005)03-0307-04 |
| 修稿时间： | 2004-10-29 |
Cloning and Construction of Plant Expression of the Coat Protein Gene of a Melon Isolate of Cucumber Mosaic Virus |
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| MA Xin-yan,GU Qin-sheng,LIU Li-feng,LI Ning,YANG Min-he,PENG Bin,LI Li. Cloning and Construction of Plant Expression of the Coat Protein Gene of a Melon Isolate of Cucumber Mosaic Virus[J]. Virologica Sinica, 2005, 20(3): 307-310 | |
| Authors: | MA Xin-yan GU Qin-sheng LIU Li-feng LI Ning YANG Min-he PENG Bin LI Li |
| Abstract: | |
| Keywords: | CMV Chinese isolate Coat protein gene Sequence analysis Plant expression vector |
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