杂合抗菌肽CecA_mil的改造及在毕赤酵母中的分泌表达 |
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引用本文: | 张素芳,曹瑞兵,贾贇,周斌,陈溥言.杂合抗菌肽CecA_mil的改造及在毕赤酵母中的分泌表达[J].微生物学报,2005,45(2). |
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作者姓名: | 张素芳 曹瑞兵 贾贇 周斌 陈溥言 |
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作者单位: | 南京农业大学 农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京 210095;辽宁出入境检验检疫局 大连 116001 |
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摘 要: | 参照毕赤氏巴斯德酵母(Pichia pastoris)偏好密码子,改造并化学合成杂合抗菌肽CecA_mil基因,改造后的CecA_mil基因克隆到pPICZα_A载体中,构建分泌型重组酵母表达载体pPICZα_A_CM,转化Pichia pastoris受体菌X_33。在醇氧化酶(AOX)启动子调控下,分子量约1.9 kD的CecA_mil杂合抗菌肽获得表达,经表达条件优化,重组酵母菌的摇瓶发酵产率可达到245μg/mL。抗菌特性研究表明,该表达产物具有广谱抗菌活性,对多数G-菌及G+菌均有较好的抑菌活性,特别是对氨苄青霉素抗性菌和卡那霉素抗性菌抑杀效果更好;具有热稳定性和酸稳定性。这些特点使得重组抗菌肽CecA_mil在食品防腐、疾病防治和动物饲料添加剂等方面显露出很好的应用前景。
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关 键 词: | 杂合抗菌肽CecA_mil,Pichia pastoris,分泌表达,抑菌活性,抗菌谱 |
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