| 氨基糖苷-(3)-乙酰转移酶Ⅱ的表达纯化及初步活性 |
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| 引用本文： | 王震,陈云波,查长森,邹立林,彭颖,季敬璋,陈秀枢,吕建新,Zhen Wang,Yun-Bo Chen,Chang-Sen Zha,Li-Lin Zou,Ying Peng,Jing-Zhang Ji,Xiu-Shu Chen,Jian-Xin Lü.氨基糖苷-(3)-乙酰转移酶Ⅱ的表达纯化及初步活性[J].细胞生物学杂志,2007,29(1):81-85. |
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| 作者姓名： | 王震 陈云波 查长森 邹立林 彭颖 季敬璋 陈秀枢 吕建新 Zhen Wang Yun-Bo Chen Chang-Sen Zha Li-Lin Zou Ying Peng Jing-Zhang Ji Xiu-Shu Chen Jian-Xin Lü |
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| 作者单位： | [1]温州医学院浙江省医学遗传学重点实验室,温州325035 [2]温州医学院细胞与分子医学研究所,温州325035 [3]温州医学院微生态学研究所,温州325035 |
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| 摘 要： | 用PCR扩增的氨基糖苷-（3）-乙酰转移酶Ⅱaac（3）-Ⅱ]基因构建了能表达较高活性AAC（3）-Ⅱ的重组工程菌，并获取重组AAC（3）-Ⅱ。含pET28a质粒的工程菌转入aac（3）-Ⅱ基因前后对氨基糖苷类抗生素的最低抑菌浓度进行比较，重组菌超声裂解上清液及其纯化的AAC（3）-Ⅱ进行SDS-PAGE和Western印迹电泳鉴定。最低抑菌浓度表明转入aac（3）-Ⅱ基因的工程菌比未转入的工程菌对庆大霉素（gentamicin，GEN）的提高了256倍，对妥布霉素（tobramycin，TOB）及其奈替米星（netilmicin，NTL）提高了16倍，电泳鉴定表明纯化荻取的是重组AAC（3）-Ⅱ，其相对分子质量约为32kDa，纯度大于95％，纯化后的10μg AAC（3）-Ⅱ，分别在10s内使80μg GEN、30s内使80μg TOB和NTL乙酰化而失去抑菌作用。研究为氨基糖苷类抗生素伴侣的开发研究初步打下基础。
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| 关 键 词： | 氨基糖苷乙酰转移酶 最低抑菌浓度 纯化 氨基糖苷类抗生素 |
| 修稿时间： | 2006-06-20 |
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