核磁共振波谱方法在顺磁金属蛋白-紫色震颤菌血红蛋白中的应用 |
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引用本文: | 夏佑林,吴季辉,光寿红,刘琴,张海阳,粱山,施蕴渝.核磁共振波谱方法在顺磁金属蛋白-紫色震颤菌血红蛋白中的应用[J].生物物理学报,1998,14(3):391-400. |
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作者姓名: | 夏佑林 吴季辉 光寿红 刘琴 张海阳 粱山 施蕴渝 |
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作者单位: | 中国科学技术大学生命科学学院,中国科学院中国科学技术大学结构生物学实验室 |
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摘 要: | 金属蛋白由于其所带金属离子具有未配对电子而具有顺磁性,致使弛豫时间缩短、谱线加宽(~50Hz)以及谱范围变大(~100ppm),因而具有与抗磁蛋白不同的谱特征。这时一些常用的2DNMR实验方法将失效。本文探索顺磁金属蛋白的几种NMR实验方法,如溶剂峰抑制、2DMCOSY、NOESY、1DNOE差谱及SUPERWEFT等,并精心设计实验条件使之适用于顺磁金属蛋白的结构研究。这些实验方法成功地应用于紫色震颤菌血红蛋白(met-VtHb-CN)。通过这些实验找到了与血红素Fe3+配位的组氨酸,并完成了该金属蛋白的顺磁位移的共振峰的识别、活性中心质子间距离的测量、抗磁性化学位移及电离常数pKa值的确定。
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关 键 词: | 顺磁金属蛋白 二维谱 NOE差谱 血红素 配位组氨酸 |
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