摘 要: | 以膜受体激动剂fMLP和PKC激活剂PMA为刺激剂,fura-2为荧光探针,分别用化学发光和荧光方法研究了嗜中性白细胞呼吸爆发与胞内外钙信号的关系。并以fluo-3为荧光探针,在激光共聚焦显微镜上观测了呼吸爆发时的胞内钙信号的时间与空间变化。fMLP能够迅速引起胞内钙变化,而PMA不引起胞内钙变化。在呼吸爆发启动时间上,fMLP明显短于PMA,且呼吸爆发的强度更高,持续时间较短。比较胞内钙信号与呼吸爆发,胞内钙变化在启动时间,到达峰值时间和持续时间上均短于呼吸爆发时间。胞内无钙时,呼吸爆发完全被抑制。胞外无钙时,呼吸爆发强度比有钙时低70%左右。激光共聚焦显微镜观测发现:细胞在fMLP作用之后胞内钙库释放钙进入胞浆并向胞外流动。当胞外有钙时,胞内钙浓度降至最低后,由于外钙内流会使其再次缓慢上升;当胞外无钙时,胞浆钙浓度降至最低后不会再回升。结果提示胞内钙信号对细胞进入呼吸爆发有重要控制作用,而胞外钙主要用于维持细胞的呼吸爆发。
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