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人A4GNT基因5'调控区的结构和功能分析
引用本文:张牧霞,张 瑶,赵 萌,郭晓华,谷玮玮.人A4GNT基因5'调控区的结构和功能分析[J].中国生物化学与分子生物学报,2010,26(10):953-961.
作者姓名:张牧霞  张 瑶  赵 萌  郭晓华  谷玮玮
作者单位:河北医科大学第三医院 实验中心, 石家庄 050051
基金项目:河北省自然科学基金项目(No.C2006000917)和 河北省卫生厅科研基金项目(No.08-144)
摘    要:为探索人α1,4-N-乙酰葡糖胺转移酶(α1,4-N-acetylglucosaminyltransferase,A4GNT)基因表达的调控机制,应用5'cDNA末端快速扩增法和引物延伸法确定了A4GNT基因的转录起始位点.在生物信息学分析的基础上,构建了系列5'缺失荧光素酶报告基因载体和定点突变载体.瞬时转染胃癌细胞MKN45和AGS.荧光素酶活性分析表明,A4GNT基因转录的核心启动子在-141bp~+116bp区域,该区域缺乏典型的TATA盒,但含有CCAAT盒、Sp1和ETS-1等转录因子潜在结合位点.突变分析显示,-136bp~-131bp的Sp1结合位点及-93bp~-89bp正向CCAAT序列对A4GNT启动子转录激活至关重要.电泳迁移率变动分析表明,这两个顺式作用元件能够与转录因子Sp1和NF-Y结合.另外,在-1464bp~-771bp区域可能含有与基因的特异性表达相关的调控元件.

关 键 词:α1  4-N-乙酰葡糖胺转移酶  启动子  荧光素酶报告基因  电泳迁移率变动分析  转录因子  
收稿时间:2010-04-28

Characterization of the 5′-Flanking Region of Human α-N-acetylglucosaminyltransferase Gene
ZHANG Mu-Xia,ZHANG Yao,ZHAO Meng,GUO Xiao-Hua,GU Wei-Wei.Characterization of the 5′-Flanking Region of Human α-N-acetylglucosaminyltransferase Gene[J].Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology,2010,26(10):953-961.
Authors:ZHANG Mu-Xia  ZHANG Yao  ZHAO Meng  GUO Xiao-Hua  GU Wei-Wei
Institution:Experiment Center, Third Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050051, China
Abstract:
Keywords:
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