Gateway○R技术构建交链孢菌JH505 cDNA文库 |
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引用本文: | 龙松华,张宁,邱德文,黎定军,黄炜.Gateway○R技术构建交链孢菌JH505 cDNA文库[J].微生物学报,2005,45(6). |
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作者姓名: | 龙松华 张宁 邱德文 黎定军 黄炜 |
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作者单位: | 中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所 北京 10081;湖南农业大学生物安全科技学院 长沙 410128 |
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摘 要: | GatewayD○R技术构建cDNA文库,利用λ噬菌体的位点特异性重组,避免使用限制性内酶切割cDNA,能够解决常规方法构建cDNA文库的技术缺陷。首次应用GatewayD○R技术构建交链孢菌cDNA文库,经检测cDNA入门文库的滴度达到1×10.7cfu/mL,文库总容量为9×10.7cfu,平均插入片段为1510bp。通过LR重组把入门文库转换为表达文库,表达文库的滴度为1.58×10.6cfu/mL,文库总容量为6.32×10.6cfu,平均插入片段大小为1680bp。表达文库的构建为进一步克隆植物激活蛋白基因打下了基础。
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关 键 词: | GatewayD○R技术, 交链孢菌, 激活蛋白, cDNA入门文库, cDNA表达文库 |
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