| 堆肥宏基因组柯斯质粒文库的构建和DNA提取技术的改进 |
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| 引用本文： | 庞 浩,封 毅,唐纪良,冯家勋.堆肥宏基因组柯斯质粒文库的构建和DNA提取技术的改进[J].微生物学通报,2009,36(5):0768-0772. |
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| 作者姓名： | 庞 浩 封 毅 唐纪良 冯家勋 |
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| 作者单位： | 1. 广西大学生命科学与技术学院,广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,广西,南宁,530005;广西生物产业新技术重点实验室,广西,南宁,530004
2. 广西大学生命科学与技术学院,广西亚热带生物资源保护利用重点实验室,广西,南宁,530005 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金(No. 30560003); 广西生物产业新技术重点实验室培育基地建设项目(No. 07-109-001-2A) |
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| 摘 要： | 堆肥环境中高浓度腐殖酸的存在阻碍了对这个环境中的未培养微生物的宏基因组研究。我们提出了一个确实可行的提取堆肥环境DNA的方法, 这个方法通过使用Sephadex G200＋酸洗PVPP层析柱与电洗脱两步纯化的方法成功地纯化堆肥环境来源的DNA, 用这个DNA成功构建了一个包含约10万个克隆的柯斯质粒文库。从这个文库中筛选到一个新的β-葡萄糖苷酶基因。针对文库低的阳性筛选率问题, 利用分子技术研究了不同的分离速度对提取到的总DNA中真核生物DNA量的影响, 以减少文库中真核生物DNA的污染。
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| 关 键 词： | 堆肥 宏基因组 DNA提取纯化 柯斯质粒文库 |
Construction of Cosmid Library of Metagenome Derived from Compost Sample and the Improvement of DNA Isolation Techniques |
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| PANG Hao,FENG Yi,TANG Ji-Liang and FENG Jia-Xun.Construction of Cosmid Library of Metagenome Derived from Compost Sample and the Improvement of DNA Isolation Techniques[J].Microbiology,2009,36(5):0768-0772. |
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| Authors: | PANG Hao FENG Yi TANG Ji-Liang and FENG Jia-Xun |
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| Institution: | College of Life Science and Technology, Guangxi Key Laboratory of Subtropical Bioresources Conservation and Utilization, Guangxi University, Nanning, Guangxi 530005, China;Guangxi Key Laboratory of BioIndustry Technology, Nanning, Guangxi 530004, China;Guangxi Key Laboratory of BioIndustry Technology, Nanning, Guangxi 530004, China;Guangxi Key Laboratory of BioIndustry Technology, Nanning, Guangxi 530004, China;College of Life Science and Technology, Guangxi Key Laboratory of Subtropical Bioresources Conservation and Utilization, Guangxi University, Nanning, Guangxi 530005, China;Guangxi Key Laboratory of BioIndustry Technology, Nanning, Guangxi 530004, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Compost Metagenome DNA isolation and purification Cosmid library |
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