芦丁通过激活NRF2/HO-1通路抑制Ang II诱导的血管平滑肌细胞表型转化和炎症反应

摘要 目的：探讨芦丁（Rutin）对血管紧张素II（Angiotensin II,Ang II）诱导的小鼠主动脉血管平滑肌细胞表型转化和炎症反应的影响及机制。方法：采用Ang II处理小鼠主动脉平滑肌细胞构建表型转化和炎症反应模型。将对数生长期的小鼠主动脉血管平滑肌细胞分为以下4组：正常对照组（Control组）,Rutin组（100 μM）,Ang II组（1μM）,Rutin+ Ang II组（100 μM,1 μM）。采用细胞增殖实验（Cell Counting Kit-8,CCK8）检测芦丁对小鼠主动脉平滑肌细胞活力的影响,采用蛋白免疫印迹实验检测α平滑肌肌动蛋白（α-Smooth muscle actin,α-SMA）、平滑肌蛋白22α（Smooth muscle protein 22-alpha,SM22α）、骨桥蛋白（Osteopontin,OPN）、基质金属蛋白酶2（Matrix metalloproteinase 2,MMP2）、基质金属蛋白酶9（Matrix metalloproteinase 9,MMP9）、白细胞介素6（Interleukin 6,IL6）、肿瘤坏死因子-α（Tumor necrosis factor-alpha,TNF-α）、核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2）、血红素氧合酶-1（Heme oxygenase-1,HO-1）、核因子活化B细胞κ轻链增强子（nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells,NF-κB）的蛋白表达和磷酸化水平,采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）检测细胞上清中TNF-α和IL6细胞因子水平,采用荧光显微镜和流式细胞术检测小鼠主动脉血管平滑肌细胞活性氧水平。结果：与对照组相比,Ang II组收缩型标志物α-SMA和SM22α表达水平降低、合成型标志物OPN表达水平升高,炎症相关因子MMP2、MMP9、IL6和TNF-α表达水平升高,NRF2和HO-1表达水平降低,NRF2及NF-κB的磷酸化增加。此外,相较于Ang II组,Rutin+ Ang II组收缩型标志物α-SMA和SM22α表达水平升高、合成型标志物OPN表达水平降低,炎症相关因子MMP2、MMP9、IL6和TNF-α表达水平降低,NRF2和HO-1表达水平升高,NRF2及NF-κB的磷酸化水平降低。结论：芦丁可以抑制Ang II诱导的小鼠主动脉血管平滑肌细胞表型转化和炎症反应,可能与其激活NRF2/HO-1通路和抑制活性氧的产生有关。

Rutin Inhibits Ang II-induced Vascular Smooth Muscle Cell Phenotypic Switching and Inflammatory Response through Activating NRF2/HO-1 Pathway