密度梯度区带离心大量提纯乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的研究

文献上通常用于大量制备纯HBsAg的方法为两次氯化铯等比重分带和一次蔗糖速率区带沉降法。但在我们实验中，此法似乎不太理想，因为所得的HBsAg通常含有极微量的正常人血清蛋白。我们采用了一种复合的纯化方法，它包括胃蛋白酶消化、DEAE纤维素层析，氯化铯浮升区带离心及蔗糖速率区带离心。此法可以制出纯HBsAg，其浮密度在氯化铯梯度中为1．1 9—1．23克／厘米’，在蔗糖梯度中为1．15—1．16克／厘米’。在纯化的HEsAg 中未测出正常人血清蛋白，给豚鼠及马匹免疫3—4次可产生单特异抗一lIBs血清，不舍抗正常人抗体，因此纯度较高。电子显微镜观察，可见均匀的小球形颗粒，未见Dane颗粒及杆状颗粒。