| 胆固醇7,8位脱氢酶的表达及催化活性研究 |
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| 引用本文： | 张璟,张文强,秦慧民,毛淑红,薛家禄,路福平. 胆固醇7,8位脱氢酶的表达及催化活性研究[J]. 中国生物工程杂志, 2017, 37(1): 21-26. DOI: 10.13523/j.cb.20170104 |
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| 作者姓名： | 张璟 张文强 秦慧民 毛淑红 薛家禄 路福平 |
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| 作者单位： | 1. 天津科技大学生物工程学院 工业发酵微生物教育部重点实验室 天津 300457;2. 河南利伟生物医药股份有限公司 焦作 454800 |
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| 基金项目： | 国家“863”计划资助项目（2011AA02A211-06） |
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| 摘 要： | 果蝇的neverland基因是胆固醇7,8位脱氢的重要酶基因。为了探究其在胆固醇脱氢反应中的催化机制,将neverland分别克隆至表达载体p IEx-6及p XY212,再转染导入S2细胞并电转化到S.cerevisiae W303-1A中表达。Western blot结果证实NVD蛋白在重组S2细胞及S.cerevisiae W303-1A中实现了表达。胆固醇转化实验经HPLC分析发现,重组S2细胞可以将胆固醇转化为7-脱氢胆固醇,而重组S.cerevisiae W303-1A并不能实现胆固醇的7,8位脱氢。此外,在重组S.cerevisiae W303-1A和S2细胞的破碎液共同转化胆固醇及NVD体外转化实验中也未发现产物7-脱氢胆固醇的生成。实验结果显示,neverland基因在S2细胞中具有生物活性而在S.cerevisiae中没有生物活性,表明它在胆固醇脱氢时需要其它的伴侣蛋白协助,实验结果为进一步研究其催化机制提供了理论基础。
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| 关 键 词： | 胆固醇7 8位脱氢酶 S2细胞 酿酒酵母W303-1A 生物转化 7-脱氢胆固醇 |
| 收稿时间： | 2016-05-13 |
Expression of Related Cholesterol Dehydrogenation Protein and Bioactivity Research |
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| ZHANG Jing,ZHANG Wen-qiang,QIN Hui-min,MAO Shu-hong,XUE Jia-lu,LU Fu-ping. Expression of Related Cholesterol Dehydrogenation Protein and Bioactivity Research[J]. China Biotechnology, 2017, 37(1): 21-26. DOI: 10.13523/j.cb.20170104 |
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| Authors: | ZHANG Jing ZHANG Wen-qiang QIN Hui-min MAO Shu-hong XUE Jia-lu LU Fu-ping |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | NVD 7-dehydrocholesterol S. cerevisiae W303-1A S2 cell Bioconversion |
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