| 基于C6流式细胞仪平台应用FRET技术在活细胞中研究蛋白质相互作用 |
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| 引用本文： | 孟坤,何庆瑜,王通,卢少华.基于C6流式细胞仪平台应用FRET技术在活细胞中研究蛋白质相互作用[J].中国生物工程杂志,2017,37(5):45-51. |
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| 作者姓名： | 孟坤 何庆瑜 王通 卢少华 |
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| 作者单位： | 暨南大学生命科学技术学院 功能蛋白质研究广东省普通高校重点实验室 广州 510632 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金面上资助项目（31570828） |
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| 摘 要： | 荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)显微镜技术被广泛应用于在活细胞中研究蛋白质相互作用。随着流式细胞术(fluorescence activated cell sorting,FACS)的发展与应用,FACS-FRET技术不但可以检测活细胞中蛋白质相互作用,还可以进行定量统计分析。由于流式细胞仪价格昂贵、FRET技术对荧光基团发光光谱的特殊要求等原因,目前为止FACS-FRET技术仅仅被应用到一些特殊的科学研究。为了解决这些问题,构建了一对新的FRET荧光基团EGFP-m Cherry,并且在小型流式细胞仪C6上检测了EGFP-m Cherry融合蛋白的FRET信号,最后使用已明确有相互作用关系的p53蛋白和MDM2蛋白做验证,证明了所构建的EGFPm Cherry可以作为检测FRET信号的荧光基团。不仅促进了FACS-FRET技术的发展,还为人类疾病治疗的药物作用靶点研究提供了有利的研究手段。
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| 关 键 词： | 活细胞 蛋白质相互作用 荧光共振能量转移 流式细胞术 |
| 收稿时间： | 2016-10-10 |
The Study of Protein-protein Interactions Using a Flow Cytometry-based FRET Technology in Living Cells |
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| MENG Kun,HE Qing-yu,WANG Tong,LU Shao-hua.The Study of Protein-protein Interactions Using a Flow Cytometry-based FRET Technology in Living Cells[J].China Biotechnology,2017,37(5):45-51. |
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| Authors: | MENG Kun HE Qing-yu WANG Tong LU Shao-hua |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Living cells Fluorescence resonance energy transfer (FRET) Protein interactions Fluorescence activated cell sorting (FACS) |
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