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α-溶血素的表达及其纳米孔的制备
引用本文:卓丽霞,王莹,张春萍,段静,张亚妮. α-溶血素的表达及其纳米孔的制备[J]. 中国生物工程杂志, 2017, 37(1): 53-57. DOI: 10.13523/j.cb.20170108
作者姓名:卓丽霞  王莹  张春萍  段静  张亚妮
作者单位:1. 西北大学生命科学学院 西安 710069;2. 西北大学化学与材料科学学院 西安 710069
基金项目:国家自然科学基金(21175105),中国博士后基金(2012M521795)资助项目
摘    要:α-溶血素(α-hemolysin,αHL)是金黄色葡萄球菌分泌的一种水溶性穿孔毒素,在双脂膜上可组装成结构稳定的七聚体蛋白纳米孔,是理想的单分子检测器件。以大肠杆菌BL21(DE3)p Lys S作为表达宿主菌株诱导表达野生型和单位点突变型α-溶血素,超滤膜分子截留法纯化蛋白质,使用兔血红细胞膜将αHL单体组装成七聚体蛋白纳米孔,并在人工脂双层膜上构建适于单分子分析的分子器件。通过溶血实验和单通道电流记录,证实αHL溶血活性良好,组装的αHL七聚体纳米孔在双脂膜上打孔能力和离子通透性良好,结构稳定,可作为理想的单分子检测器件。此方法为大量制备αHL单体及其在单分子分析和应用研究方面奠定了基础。

关 键 词:α-溶血素  单通道电流  单分子检测器件  蛋白纳米孔  
收稿时间:2016-08-23

The Expression of α-Hemolysin and the Preparation of Its Nanopore
ZHUO Li-xia,WANG Ying,ZHANG Chun-ping,DUAN Jing,ZHANG Ya-ni. The Expression of α-Hemolysin and the Preparation of Its Nanopore[J]. China Biotechnology, 2017, 37(1): 53-57. DOI: 10.13523/j.cb.20170108
Authors:ZHUO Li-xia  WANG Ying  ZHANG Chun-ping  DUAN Jing  ZHANG Ya-ni
Abstract:
Keywords:Single-channel current  Protein nanopore  α-hemolysin  Single-molecule detection device  
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