| 玉米弯孢叶斑病菌clt-1基因生物信息学分析和启动子的功能鉴定 |
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| 引用本文： | 倪璇,高金欣,余传金,刘铜,李雅乾,陈捷.玉米弯孢叶斑病菌clt-1基因生物信息学分析和启动子的功能鉴定[J].中国生物工程杂志,2017,37(3):37-42. |
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| 作者姓名： | 倪璇 高金欣 余传金 刘铜 李雅乾 陈捷 |
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| 作者单位： | 1. 上海交通大学农业与生物学院 农业部都市农业(南方)重点开放实验室 上海 200240;
2. 上海交通大学 国家微生物代谢重点实验室 上海 200240 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31471734），国家玉米产业技术体系（CARS-02）资助项目 |
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| 摘 要： | 利用农杆菌介导的基因转化(Agrobacterium-mediated transformation,ATMT)技术构建玉米弯孢叶斑病菌突变体库,并从中筛选到了一个毒素合成相关基因clt-1。对clt-1基因编码的蛋白质进行生物信息学分析,结果表明CLT-1的分子质量为81.984 8k Da,等电点p I为8.62,不稳定指数为55.08;CLT-1是亲水性蛋白,包含1个膜外区域。在亚细胞水平上,CLT-1定位于细胞核内;在氨基酸序列方面,CLT-1含有多个苏氨酸、丝氨酸和酪氨酸激酶磷酸化位点;在功能方面,CLT-1包含BTB特征结构域,可能参与一些功能蛋白质活性的调控。利用GFP(green fluorescent protein)基因作为报告基因,构建了用于鉴定clt-1基因启动子活性的p C1300th-Pclt1-GFP真菌表达载体,采用ATMT方法转化弯孢菌萌发的分生孢子,通过PCR及GFP荧光检测clt-1基因启动子在弯孢菌中调控GFP基因表达的活性。结果表明,在共聚焦激光扫描显微镜下观察到菌丝和孢子发绿色荧光,说明弯孢菌clt-1基因启动子具有较强驱动外源gfp基因表达的活性。
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| 关 键 词： | 玉米弯孢叶斑病菌 生物信息学 clt-1 启动子活性 GFP |
| 收稿时间： | 2016-09-18 |
Bioinformatic Analysis and Promoter Identification of clt-1 Gene in Curvularia Lunata |
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| NI Xuan,GAO Jin-xin,YU Chuan-jin,LIU Tong,LI Ya-qian,CHEN Jie.Bioinformatic Analysis and Promoter Identification of clt-1 Gene in Curvularia Lunata[J].China Biotechnology,2017,37(3):37-42. |
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| Authors: | NI Xuan GAO Jin-xin YU Chuan-jin LIU Tong LI Ya-qian CHEN Jie |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Curvularia lunata Promoter activity GFP Bioinformatic clt-1 |
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