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7肽和12肽两种M13噬菌体展示库筛选肿瘤坏死因子alpha拮抗肽的比较
引用本文:胡昌武,谢君,朱乃硕.7肽和12肽两种M13噬菌体展示库筛选肿瘤坏死因子alpha拮抗肽的比较[J].中国生物工程杂志,2017,37(5):1-8.
作者姓名:胡昌武  谢君  朱乃硕
作者单位:复旦大学生命科学学院 遗传工程国家重点实验室 微生物与分子免疫学实验室 上海 200438
基金项目:国家自然科学基金(30901315,30970144)、国家“863”计划重大课题(2011AA02A114)、上海市科委支撑项目(13431900602)资助项目
摘    要:肿瘤坏死因子alpha的拮抗剂是治疗多种炎症性自身免疫疾病的首选,但抗体类拮抗物因副作用明显而使用受限,尤其是机体内抗抗体的产生,严重影响治疗效果和药物代谢。而肽类物除免疫原性低之外,和小分子相比也有更低的毒性和更强的靶标特异性。使用7肽和12肽两种M13噬菌体展示库筛选TNFα拮抗肽,以分析7肽和12肽分别作为TNFα拮抗肽的亲和性与功能性。经过3~4轮的筛选和验证,得到2条7肽序列和2条12肽序列。利用ELISA方法检测合成肽与TNFα结合的亲和性,编号632的7肽亲和性最强,Kd=138nmol/L;编号636的12肽亲和性稍差,Kd=8.59μmol/L。InsightⅡ软件分别分析632肽和636肽与TNFα二聚体结合,发现632肽与TNFα二聚体结合更加稳定,并且在细胞水平上632肽拮抗TNFα活性功能比636肽更强,有632肽存在的条件下TNFα诱导的L929细胞生存率上升了3倍,而636肽的作用只有2倍。7肽比12肽更适合作为TNFα拮抗肽。

关 键 词:拮抗肽  噬菌体展示库  肿瘤坏死因子  
收稿时间:2016-11-01

Comparison of the Inhibitory Efficiency of M13 Based 7-mer and 12-mer Phage Display Libraries Derived Peptides as Tumor Necrosis Factor Alpha Antagonist
HU Chang-wu,XIE Jun,ZHU Nai-shuo.Comparison of the Inhibitory Efficiency of M13 Based 7-mer and 12-mer Phage Display Libraries Derived Peptides as Tumor Necrosis Factor Alpha Antagonist[J].China Biotechnology,2017,37(5):1-8.
Authors:HU Chang-wu  XIE Jun  ZHU Nai-shuo
Abstract:
Keywords:Phage display library  Antagonistic peptide  Tumor necrosis factor  
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