| 人组氨酸磷酸酶蛋白PHPT1的细胞定位及其对细胞层状伪足形成的影响 |
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| 引用本文： | 徐安健,李艳萌,李斯文,乌姗娜,张蓓,黄坚.人组氨酸磷酸酶蛋白PHPT1的细胞定位及其对细胞层状伪足形成的影响[J].中国生物工程杂志,2017,37(6):17-21. |
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| 作者姓名： | 徐安健 李艳萌 李斯文 乌姗娜 张蓓 黄坚 |
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| 作者单位： | 1. 首都医科大学附属北京友谊医院 科研实验中心 北京 100875;2. 首都医科大学附属北京友谊医院 临床检验中心 北京 100875 |
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| 基金项目： | 北京优秀人才培养项目资助项目（2016000021469G227） |
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| 摘 要： | 目的:获取人组氨酸磷酸酶蛋白PHPT1基因,并构建其C端GFP融合的真核表达载体,通过瞬时转染观察融合蛋白在细胞内的表达和定位,并研究其定位与细胞层状伪足形成的关系。方法:以人宫颈癌细胞株HeLa cDNA为模板,PCR扩增PHPT1的全长编码基因,克隆到pEGFPN2载体中,构建pEGFP-N2-PHPT1真核表达载体,利用脂质体将构建的载体转染到HeLa细胞中,用激光共聚焦扫描显微镜观察C端GFP连接的PHPT1的细胞定位,并进一步探讨其定位与细胞层状伪足形成的关系。结果:成功构建了PHPT1的GFP融合表达载体pEGFP-N2-PHPT1,并在He La细胞中检测到了融合蛋白的表达,发现其定位与细胞层状伪足的形成密切相关,并可直接影响细胞的运动能力。结论:GFP融合形式表达的PHPT1蛋白在细胞质和细胞核中均有表达,并且定位于细胞层状伪足的前沿,影响细胞层状伪足的形成,从而影响细胞运动。
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| 关 键 词： | GFP融合表达 定位分析 层状伪足 PHPT1 |
| 收稿时间： | 2016-12-22 |
The Location of GFP Fused PHPT1 and Its Effect on Lamellipodia Formation |
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| XU An-jian,LI Yan-meng,WU Shan-na,LI Si-wen,ZHANG Bei,HUANG Jian.The Location of GFP Fused PHPT1 and Its Effect on Lamellipodia Formation[J].China Biotechnology,2017,37(6):17-21. |
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| Authors: | XU An-jian LI Yan-meng WU Shan-na LI Si-wen ZHANG Bei HUANG Jian |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Lamellipodia Location analysis PHPT1 GFP fused expression |
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