| 基因组重排筛选高产谷氨酰胺转胺酶菌株 |
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| 引用本文： | 宋佳雯,田苏,张玉如,王志珍,常忠义,高红亮,步国建,金明飞. 基因组重排筛选高产谷氨酰胺转胺酶菌株[J]. 中国生物工程杂志, 2017, 37(9): 105-111. DOI: 10.13523/j.cb.20170914 |
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| 作者姓名： | 宋佳雯 田苏 张玉如 王志珍 常忠义 高红亮 步国建 金明飞 |
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| 作者单位： | 1. 华东师范大学生命科学学院 上海 200241;2. 泰兴市东圣食品科技有限公司 泰兴 225411 |
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| 基金项目： | 中央高校基本科研业务费专项基金资助项目（78210203） |
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| 摘 要： | 谷氨酰胺转胺酶(TGase)的产量不足的问题一直限制其工业化生产规模,故采用基因组重排的方法,筛选高产谷氨酰胺转胺酶菌株。通过对不同制备条件下原生质体纯度和形成率的考量,获得制备原生质体的最优条件为以6mg/ml的溶菌酶浓度进行酶解,酶解时间2h。再优化融合条件,以2min紫外灭活和40min热灭活结合的方法挑选出融合子。通过两轮基因组重排,经过96孔板发酵高通量筛选和摇瓶发酵复筛验证,获得了一株产酶达7.12U/ml的茂源链霉菌,相比最初选用菌株的平均酶活提高65.5%。发酵结果显示,酶活提高的原因可能是在重组后原酶成熟更快、更彻底,且得到的菌株遗传稳定性良好。证明基因组重排能够有效提高菌株的产酶水平,同时为谷氨酰胺转胺酶产量提高提供理论依据。
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| 关 键 词： | 微生物谷氨酰胺转胺酶(TGase) 茂源链霉菌 高通量筛选 基因组重排 |
| 收稿时间： | 2017-02-28 |
Genome Shuffling Enhances Transglutaminase Production of Streptomyces mobaraensis |
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| SONG Jia-wen,TIAN Su,ZHANG Yu-ru,WANG Zhi-zhen,CHANG Zhong-yi,GAO Hong-liang,BU Guo-jian,JIN Ming-fei. Genome Shuffling Enhances Transglutaminase Production of Streptomyces mobaraensis[J]. China Biotechnology, 2017, 37(9): 105-111. DOI: 10.13523/j.cb.20170914 |
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| Authors: | SONG Jia-wen TIAN Su ZHANG Yu-ru WANG Zhi-zhen CHANG Zhong-yi GAO Hong-liang BU Guo-jian JIN Ming-fei |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Transglutaminase Streptomyces mobaraensis Genome shuffling High-throughput screening |
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