| 血小板第四因子在原核中的高效表达、分离纯化及活性测定 |
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| 引用本文： | 顾洁,刘拥军,卢士红,蔡英林,刁世勇,韩忠朝. 血小板第四因子在原核中的高效表达、分离纯化及活性测定[J]. 生物技术, 2002, 12(6): 7-9 |
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| 作者姓名： | 顾洁 刘拥军 卢士红 蔡英林 刁世勇 韩忠朝 |
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| 作者单位： | 中国医学科学院中国协和医科大学血液学研究所,实验血液学国家重点实验室,天津,300020 |
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| 基金项目： | 国家杰出青年科学基金 ( 3972 5 0 1 4)，攀登计划专项基金资助项目 ( 95 -专 - 1 0 ) |
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| 摘 要： | 目的：构建重组表达质粒pET-32c/PF4，并在原核中进行表达，以探讨其对白血病细胞系（HEL）细胞增殖的作用。方法：通过PCR方法从含有PF4基因的PQE-60/PF4质粒中扩增PF4，用NcoⅠ/HindⅢ双酶切，克隆到原核表达质粒pET-32C中，使之在BL21表达，Ni-Chelating Sepharose亲和柱纯化，用细胞集落形成方法研究重组PF4对HEL的抑制作用。结果：菌株筛选后在大肠杆菌中获得可溶性高效表达，重组PF4占菌体总蛋白的22%，肠激酶酶切除去端啧合部分，获得了高纯度的重组人血小板第四因子（rh-PF4)，纯度为95%以上，活性实验发现重组PF4可抑制HEL细胞集落的形成，抑制率为47%，结论：原核表达质粒pET-32C可高效可溶性表达PF4，重组PF4对HEL细胞的增殖有抑制作用。
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| 关 键 词： | 血小板第四因子 原核 高效表达 分离纯化 活性测定 |
| 文章编号： | 1004-311X(2002)06-0007-03 |
| 修稿时间： | 2002-07-28 |
Expression purification and characterization of platelet factor four from Escherichia coli |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PF4 |
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