高产阿魏酸酯酶菌株的筛选鉴定及其酶活测定条件优化

通过透明圈初筛和固体发酵复筛从野外采集的和实验室保藏的共106株大型真菌菌株中筛选得到两株高产阿魏酸酯酶的菌株,经ITS序列测定结合子实体形态鉴定为一色齿毛菌(Cerrena unicolor)和血红密孔菌(Pycnoporus sanguineus);以米糠为诱导培养基测定了两个菌株产阿魏酸酯酶的酶活曲线,并选取活性最高的粗酶液进行了酶活测定条件优化。结果表明:以米糠为诱导培养基时,一色齿毛菌和血红密孔菌的阿魏酸酯酶活性分别在第4天和第6天达到最高;经优化得出一色齿毛菌粗酶液的阿魏酸酯酶最适测定条件为40℃、反应时间25 min、添加30 μL粗酶液和400 μL阿魏酸甲酯溶液,血红密孔菌粗酶液的最适测条件为30℃、反应时间35 min、添加20 μL粗酶液和400 μL阿魏酸甲酯溶液。