菜蛾斑蝥素受体PP2A催化亚基基因的原核表达与纯化

为获得菜蛾斑蝥素受体PP2Ac的蛋白，支持斑蝥素受体结合机理等相关研究，本试验以菜蛾cDNA为模板，利用PCR方法扩增得到菜蛾PP2Ac基因，将PP2Ac基因连接至经Hind III与Bam HI双酶切处理的pET-30a原核表达栽体中，获得重组质粒并将其命名为pET30a-PX-PP2Ac。将pET30a-PX-PP2Ac化至大肠杆茵BL21中进行诱导表达获得的目的蛋白后，使用Ni-琼脂糖柱纯化对重组蛋白进行纯化。结果表明，菜蛾PP2Ac基因可以在大肠杆菌中表达，目的蛋白在不同的温度下均以包涵体形式存在。优化后的诱导表达条件是IPTG浓度0.2mM和温度30℃，目的蛋白大小约38KD。