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| 嗜线虫致病杆菌HB310几丁质酶基因chi70的克隆和表达 | |
| 基金项目： | 河北省自然科学基金（C2014204117）;河北省现代农业产业技术体系棉花创新团队 |
| 摘 要： | 为了了解嗜线虫致病杆菌Xenorhabdus nematophila几丁质酶的功能，本研究通过PCR技术从X nematophila HB310菌株中克隆得到了几丁质酶基因chi70，对该基因进行了生物信息学分析。结果表明该基因全长1947 bp，编码648个氨基酸，表达的Chi70蛋白不含信号肽。将chi70基因进行原核表达，获得大量重组Chi70蛋白。采用二硝基水杨酸法（DNS法）测定重组蛋白酶活，结果表明几丁质酶Chi70在pH70时活性最高，为8815 U/mL。采用生测方法测定 Chi70对苏云金芽孢杆菌HD-73（Bt HD-73）的增效活性，结果表明单独使用Bt HD-73时对2龄棉铃虫幼虫的LC50为1480 μg/mL，添加Chi70后的Bt HD-73对2龄棉铃虫幼虫的LC50为 566 μg/mL，实验结果说明Chi70对Bt具有明显的增效作用。 |
| 关 键 词： | Xenorhabdus nematophila chi70 gene gene cloning protokaryotic expression chitinase enzyme Activity |
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