| 截短的人精子特异性乳酸脱氢酶L178X突变体丧失催化活性 |
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| 引用本文： | 颜水堤,张 朵,曾 健,富显果,柯龙凤,兰风华. 截短的人精子特异性乳酸脱氢酶L178X突变体丧失催化活性[J]. 中国生物化学与分子生物学报, 2010, 26(7): 678-682 |
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| 作者姓名： | 颜水堤 张 朵 曾 健 富显果 柯龙凤 兰风华 |
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| 作者单位： | （福建医科大学 福总临床医学院临床遗传与实验医学科，福州 350025） |
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| 基金项目： | 福建省重点科技攻关项目（2002Y032）和全军医药卫生“十五”基金项目（01MA032） |
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| 摘 要： | 精子特异性乳酸脱氢酶(乳酸脱氢酶C4,LDH-C4)是精子能量代谢的关键酶类之一.为了研究前期发现的1个LDH-C4基因突变(L178X)对LDH-C4功能的影响,在已构建的LDH-C4原核表达载体pET-28a(+)-hLDHC的基础上,利用PCR定点诱变技术,制备了L178X突变体的原核表达载体pET-28a(+)-hLDHC/L178X,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)plysS,诱导其表达.对该载体进行限制性酶切表明,插入的LDHC基因cDNA约1000bp;序列分析表明,该插入片段读框正确,带L178X突变.SDS-PAGE及免疫印迹显示,携带该载体的菌体可表达分子量约25kD的蛋白质,后者可被兔抗LDH-C4血清特异识别.乳酸脱氢酶(LDH)活性测定及活性染色表明,所表达的产物没有LDH活性.本研究成功进行了LDH-C4的1个突变体的原核表达,为研究LDHC基因突变对LDH-C4功能以及男性生育的影响奠定了基础.
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| 关 键 词： | 精子特异性乳酸脱氢酶 LDH-C4 基因突变 LDHC基因 原核表达 |
| 收稿时间： | 2010-01-04 |
Truncated Human Sperm-specific Lactate Dehydrogenase L178X Mutant Loses Catalytic Activity |
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| YAN Shui-Di,ZHANG Duo,ZENG Jian,FU Xian-Guo,KE Long-Feng,LAN Feng-Hua. Truncated Human Sperm-specific Lactate Dehydrogenase L178X Mutant Loses Catalytic Activity[J]. Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology, 2010, 26(7): 678-682 |
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| Authors: | YAN Shui-Di ZHANG Duo ZENG Jian FU Xian-Guo KE Long-Feng LAN Feng-Hua |
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| Affiliation: | (Department of Clinical Genetics and Experimental Medicine, Fuzong Clinical College, Fujian Medical University, Fuzhou 350025, China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | sperm-specific lactate dehydrogenase LDH-C4 gene mutation LDHC gene prokaryotic expression |
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