| 小鼠胚胎干细胞p16INK4a基因外显子1α打靶研究 |
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| 引用本文： | 龚振明,李坚,傅继梁.小鼠胚胎干细胞p16INK4a基因外显子1α打靶研究[J].遗传学报,2002,29(1). |
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| 作者姓名： | 龚振明 李坚 傅继梁 |
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| 作者单位： | 1. 第二军医大学医学遗传教研室,上海,200433;上海交通大学动物科学系,上海,201101
2. 第二军医大学医学遗传教研室,上海,200433 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金重点项目 ( 39830 36 0 )，上海联合利华科技和发展基金 ( 980 8)~~ |
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| 摘 要： | 在活体水平上 ,小鼠p16 INK4a基因是否具有抑制肿瘤发生和发展的功能是一个悬而未决的问题。利用筛选基因组文库得到的小鼠p16 INK4a基因组DNA片段 ,构建了针对小鼠p16 INK4a 基因外显子 1α的基因打靶载体 ,其短臂为1.5kbEco81Ⅰ AccⅡ片段 ,长臂为 5 .9kbXbaⅠ XhoⅠ片段。打靶载体经线性化和纯化后通过电穿孔转导小鼠R1ES细胞 ,获得 37个G418和Gancyclovir双药抗性克隆。用Southern杂交法对双药抗性克隆进行鉴定 ,获得一个敲除了p16 INK4a基因外显子 1α的阳性ES细胞克隆。
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| 关 键 词： | p16INK4a 基因打靶 |
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